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Influence de l'hématocrite, des tensions sanguines et du pH sur les relations pression-flux dans le poumon canin isolé. Une préparation pulmonaire canine isolée perfusée dans laquelle des déterminants de calibre vasculaire pouvaient être contrôlés individuellement a été développé. La relation des pressions artérielles pulmonaires (Pa), veineuses (PV) et alvéolaires (PA) était telle que Pa plus grand que PA plus grand que PV dans tout le poumon. L'ajout d'isoprénaline au perfusat a aboli la réactivité vasculaire. Une fois la stabilité atteinte, la zone transversale vasculaire est restée acceptablement constante pendant 2,25 heures, jugée par la conductivité normalisée. L'influence de l'hématocrite perfusé, des tensions sanguines et du pH sur les relations pression-flux a ensuite été étudiée dans 15 poumons canins isolés. Le rapport de conductance hématocrite-vasculaire a été dérivé à une pression de perfusion constante. La conductivité a varié linéairement avec l'hématocrite sur une plage de 16,5 à 89,5%. Les tensions moyennes des gaz sanguins artériels pulmonaires étaient : PO2 = 121 mm Hg, PCO2 = 28 mm Hg et pH = 7,46. L'acidose respiratoire aiguë (PO2 = 30 mm Hg, PCO2 = 81 mm Hg, pH = 7,17) et l'acidose lactique et l'hypoxémie (PO2 = 32 mm Hg, PCO2 = 21 mm Hg, pH = 6,96) n'ont pas modifié significativement cette relation. La transformation des données de conductance-hématocrite a indiqué que l'hématocrite était le déterminant le plus important de la viscosité apparente relative du sang. Tant l'acidose respiratoire aiguë et l'acidose lactique n'a pas permis d'augmenter de manière significative la viscosité relative dans la gamme d'hématocrite généralement trouvée dans la polycythémie secondaire.
Interaction du réflexe chimioréflexe et du réflexe d'inflation pulmonaire dans la régulation de la circulation coronaire chez les chiens conscients. L'interaction de la chimioréflexion et du contrôle réflex de l'inflation pulmonaire de la circulation coronarienne a été étudiée chez les chiens conscients en comparant les réponses à la stimulation chimioréflexive (injection intracarotique de nicotine) lorsque la ventilation a été autorisée à augmenter avec celles lorsque la ventilation était contrôlée. Les réponses ont également été comparées à celles déclenchées par l’hyperinflation mécanique forcée et spontanée. Lorsque la fréquence cardiaque était constante, la nicotine administrée par voie intracarotide induisit une augmentation de la profondeur de la respiration suivie de près d'une augmentation du débit coronaire diastolique tardif de 48 +/- 2 à 106 +/- 8 ml/min et d'une réduction de la résistance coronaire diastolique tardif de 1,62 +/- 0,08 à 0,78 +/- 0,06 mm Hg/ml min-1. Après le blocus bêta-récepteur et cholinergique, une dilatation coronaire similaire en réponse à la nicotine n'a eu lieu que lorsque la ventilation a été autorisée à augmenter. Cependant, lorsque la ventilation a été contrôlée, la nicotine administrée par voie intracarotide a augmenté la résistance coronarienne après un blocus bêta-récepteur et cholinergique combiné. La dilatation coronarienne réflexe n'a pas été observée après la section du nerf sinusal carotide ou après le blocus des récepteurs alpha. Ainsi, la stimulation de la nicotine de la chimioréflexion carotide entraîne une dilatation coronaire frappante qui a deux composants. La composante mineure implique un chimioréflexe avec son chemin effervescent dans le vagin. La principale composante de la dilatation coronarienne suit une augmentation de la profondeur de la respiration, et sa composante efférente semble impliquer le retrait du tonus constricteur alpha-adrénergique. Une période presque identique de dilatation coronarienne réflexe a suivi soit une hyperinflation mécanique forcée, soit spontanée chez le chien conscient.
Effet du flux sanguin coronaire sur le flux glycolytique et le pH intracellulaire dans les cœurs de rats isolés. Le taux de flux sanguin coronaire a été varié dans les préparations cardiaques isolées de rats de travail pour déterminer son influence sur le taux d'utilisation de la glucose, les phosphates à haute énergie des tissus et le pH intracellulaire. Une réduction de 60% du flux sanguin coronaire a entraîné une réduction de 30% de la consommation d'oxygène, un taux accéléré d'utilisation du glusoe, des niveaux plus faibles de phosphate à haute énergie dans les tissus et des niveaux plus élevés de lactate et de H+. Performances ventriculaires détériorées reflétées par une diminution de la fréquence cardiaque et de la pression systolique de pointe. Des réductions supplémentaires du flux sanguin coronaire ont entraîné une inhibition de la glycolyse, une diminution plus importante des niveaux tissulaires de phosphates à haute énergie et des niveaux tissulaires plus élevés de lactate et de H+. Ces changements dans le flux glycolytique, les métabolites tissulaires et les performances ventriculaires étaient proportionnels au degré de restriction du flux sanguin coronaire. L’importance du flux sanguin coronaire et du lavage de l’espace interstitiel dans le maintien d’un flux glycolytique accéléré dans les cœurs en manque d’oxygène est soulignée. On conclut que l'accélération de la production d'ATP par la glycolyse ne peut se produire que dans le tissu ischémique marginal dans la zone périphérique du tissu fourni par une artère occlusive. La zone centrale du tissu qui reçoit un faible taux de flux sanguin coronaire aura un taux réduit de production d'ATP en raison à la fois d'un manque d'oxygène et d'une inhibition de la glycolyse.
Mécanismes d'inhibition glycolytique dans les cœurs ischémiques des rats. Les mécanismes d'inhibition glycolytique dans le myocarde ischémique ont été étudiés dans le cœur de rat isolé et perfusé. La glycolyse a été inhibée au niveau de la glycéraldéhyde-3-phosphate déshydrogénase. Les principaux facteurs qui expliquaient l'inhibition glycolytique dans le cœur ischémique par rapport au cœur anoxique semblaient être des niveaux tissulaires plus élevés de lactate et de H+ dans le tissu ischémique. L'augmentation du pH extracellulaire inhibe la glycolyse dans les cœurs anoxiques et hypoxiques beaucoup plus facilement que dans les cœurs aérobiques. Cependant, le maintien du pH extracellulaire et intracellulaire n’a provoqué qu’une modeste accélération de la glycolyse dans les cœurs ischémiques. L'accumulation de lactate tissulaire et l'inhibition de la glycolyse étaient directement proportionnelles à la réduction du débit coronaire dans les cœurs anoxiques et ischémiques. A des concentrations intracellulaires de lactate comprises entre 15 et 20 mM, la glycolyse a été inhibée dans les deux conditions. L'ajout de 10, 20 ou 40 mM de lactate au perfusat inhibe la glycolyse dans les cœurs aérobiques, anoxiques et ischémiques. L'effet du lactate ne semble pas être médié par des changements dans le pH intracellulaire. Il est conclu que l'accumulation de lactate représente un facteur majeur dans l'inhibition de la glycolyse qui se développe dans les cœurs ischémiques.
Comparaison des performances contractiles des muscles atrial et ventriculaire canin. Cette étude a comparé la performance contractile d'un trabecule atrial droit canin à celle d'un trabecule macroscopiquement indistinguible isolé du sommet ventriculaire droit. Le cœur a été retiré de neuf chiots de mongrel pesant 6 à 8 kg et placé dans la solution de bicarbonate de Krebs-Ringer. La solution de baignade ne contenait que 1,25 mmol de Ca2+ et a été ampoulée avec un mélange de gaz 95% O2-5% CO2. Chaque trabecule auriculaire a été spécifiquement sélectionné à partir de l'appendice auriculaire droit. Histologiquement, ces trabécules ont montré une remarquable orientation longitudinale des fibres. À Lmax (la longueur du muscle auquel la tension a été développée était maximale) dans des conditions identiques de température, de vitesse de stimulation, de milieu ionique, de pH et d'approvisionnement en O2 et CO2, les trabécules auriculaire droit ont atteint les mêmes tensions développées et totales mais en un temps beaucoup plus court que les trabécules ventriculaire. Dans les deux groupes musculaires, la tension maximale développée était en moyenne d'environ 2,5 g/mm2. Puisque Lo (exprimé en fraction de Lmax) était moins dans le muscle auriculaire que dans le muscle ventribulaire, nous avons conclu que le muscle auriculaire peut être étiré considérablement plus que le muscle ventriculaire avant que la longueur optimale soit atteinte. À n'importe quelle longueur initiale du muscle donnée, la hausse maximale de la tension pour les trabécules auriculaire était d'au moins deux fois celle pour les trabécules ventriculaire. À une charge donnée allant jusqu'à 1,5 g/mm2, la vitesse maximale de raccourcissement d'une trabécule atriale était d'environ trois à quatre fois celle d'une trabécule ventriculaire. Ces résultats indiquent collectivement que la performance contractile du muscle atrial droit est à bien des égards supérieure à celle du ventricule droit, au moins dans les conditions de ces expériences.
Les rapports d'activité sérique de la lactate déshydrogénase avec les différents substrats. L'activité de la lactate déshydrogénase de 89 séras chez les patients atteints d'infarctus du myocarde et de 55 séras chez les patients atteints de lésions hépatocellulaires a été évaluée dans des conditions optimales en utilisant le pyruvate, l'alpha-oxobutyrate, l'hydroxypyruvate et le glyoxylate comme substrates. L'activité de la lactate déshydrogénase de 89 séras chez les patients atteints d'infarctus du myocarde et de 55 séras chez les patients atteints de lésions hépatocellulaires a été évaluée dans des conditions optimales en utilisant le pyruvate, l'alpha-oxobutyrate, l'hydroxypyruvate et le glyoxylate comme substrates. L'activité a également été mesurée avec le lactate comme substrat à des valeurs de pH différentes. Les rapports d'activité dans ces différentes conditions d'essai ont été calculés pour les deux séries de patients. Les différenciations correctes pour les rapports uniques allant de pratiquement nul pour l'hydroxypyruvate/alpha-oxobutyrate à plus de 93 pour cent pour le glyoxylate/hydroxypyruvate et le glyoxylate/alpha-oxobutyrate. Ceci a été peu amélioré par l'utilisation de multiples ratios impliquant jusqu'à sept essais distincts. Le rapport d'activité de l'hydroxypyruvate au pyruvate qui est constamment supérieur à l'unité a été trouvé pour être inversé dans un cas d'empoisonnement par la morphine.
Analyse fluorométrique de la N-acétylprocainamide. Nous décrivons un test fluorométrique simple et rapide pour une analyse quantitative séparée de la procaïnamide et de la N-acétylprocaïnamide dans des mélanges. La gamme efficace (fluorescence vs. concentration) dans le sérum est de 0,1 à 10,0 mg/l, indépendamment du rapport (en poids) des deux médicaments de 1:10 à 10:1. Les récupérations analytiques par la méthode d'extraction utilisée ont été de 100.0 +/- 3.0% et de 98.0 +/- 4.0%, respectivement. Pour la détermination des deux composés, le coefficient de variation maximal était de 10%.
Mesure cinétique rapide du lactate dans le plasma avec un analyseur centrifuge. Dans cette méthode, le sang est collecté dans les tubes de microhématocrite héparinés par l'ammonium et le lactate est déterminé directement dans le plasma, séparé dans les 15 minutes des érythrocytes. Le lactate est analysé en mélangeant 10 mules d'échantillon avec NAD+ et la lactate déshydrogénase dans le tampon de tris(hydroxyméthyl)aminométhane hydrazine. Le taux d'augmentation de l'absorption du NADH formé, mesuré à 340 nm, est proportionnel à la concentration de lactate. L’essai est complet en 4 minutes et l’absorption est linéairement liée à une concentration de 0,625 à 15 mmol/litre. Les récupérations analytiques de lactate ajouté au plasma ont été en moyenne de 104% (range, 91-116%). Les résultats ont été bien comparés pour les échantillons de plasma analysés par cette méthode avec le CentrifiChem et le Du Pont aca.
Système d'électrophorèse de papier haute résolution amélioré pour l'utilisation dans le dépistage des aminoacidopathies. L'électrophorèse de papier haute tension de petits échantillons de sérum et d'urine à pH 6,0 dissout les acides aminés basiques et acides et les sépare des acides aminés neutres. Pour la séparation et l'identification des acides aminés neutres, la zone appropriée de l'électrophoretogramme est coupée, cousu sur une deuxième feuille de papier, et rerun à pH 1.9. Grâce à cette méthode, les acides aminés sont rapidement dissous. Il convient à l'utilisation avec des procédures spéciales telles que l'oxydation du fluide biologique avec de l'acide performatique et des teintures spécifiques pour la confirmation de l'identification des acides aminés.
Une méthode clinique pour la détermination de la gamma-glutamil transpeptidase sérique. Une méthode simple, hautement sensible et reproductible pour l'analyse de l'activité de la gamma-glutammyl transpeptidase (EC 2.3.2) est introduite, en utilisant le gamma-glutammyl-p-nitroanilide comme substrat et la glycylglycine comme accepteur dans 50 g/l de polyoxyéthylène nonylphénol. L'activité sérique de la transpeptidase a été évaluée chez 1080 adultes sains, la valeur moyenne normale étant de 14,8 mU/ml. L'évaluation diagnostique de l'enzyme dans diverses maladies hépatobiliaires est également discutée.
Traitement de l’hypertension rénale. Il existe différents types d'hypertension rénale: hypertension due à la maladie rénale parenchymale, hypertension renovasculaire, hypertension due à la maladie urologique, hypertension de la maladie rénale en phase terminale. Le traitement doit considérer avant tout la possibilité de procédures spécifiques, médicales ou chirurgicales qui peuvent causer la maladie sous-jacente. Si la maladie sous-jacente n'est pas susceptible d'une thérapie spécifique, un traitement médical symptomatique pour abaisser la pression artérielle est indiqué: outre le contrôle de l'apport en sodium et du poids corporel, des médicaments antihypertendus sont généralement indiqués. Nous les utilisons, seuls ou en combinaison, dans l'ordre suivant: diurétiques, bêta-bloquants, dihydralazine, reserpine, clonidine, alpha-méthyldopa, guanethidine.
Glycolyse anaérobie dans des érythrocytes humains normaux incubés in vitro avec du salicylate de sodium. Certains effets du salicylate de sodium sur la glycolyse anaérobie ont été étudiés chez les érythrocytes humains normaux incubés jusqu'à 6 heures à 37 degrés C dans la séra autologue.1. La consommation de glucose et la production de lactate ont été stimulées par des concentrations de salicylate allant jusqu'à 60 mmol/l, mais à la concentration la plus élevée utilisée (90 mmol/l), une stimulation initiale a été suivie par une inhibition de la glycolyse. Des pertes ont eu lieu d'adénosine 5'-triphosphate (ATP), adénosine 5'-diphosphate (ADP) et adénosine 5'-phosphate (AMP) à des concentrations plus élevées de salicylate et il y a eu une augmentation concomitante de phosphate inorganique. D'autres esters de phosphate ont subi des changements de concentration à des concentrations plus élevées de salicylate qui ont reflété des concentrations insuffisantes d'ATP pour la glycolyse. Les taux d'efflux de sodium et d'afflux de potassium dans les érythrocytes n'ont pas été affectés par la présence de salicylate à des concentrations suffisantes pour stimuler la glycolyse.
Catécholamines artérielles dans l'exercice hypoxique chez l'homme. Nous avons mesuré les concentrations de catécholamine de la ventilation et du sang artériel dans quatre hommes normaux debout et à deux niveaux d'exercice modéré à moteur respirant 14% d'oxygène ou d'air.1 Nous avons mesuré les concentrations de catécholamine de la ventilation et du sang artériel dans quatre hommes normaux debout et à deux niveaux d'exercice modéré à moteur respirant 14% d'oxygène ou d'air. La ventilation minute était significativement plus élevée pendant l'exercice hypoxique que pendant l'exercice normoxique à une absorption d'oxygène de 1500 ml/min. La noradrénaline dans le plasma artériel pendant l'exercice hypoxique à une absorption d'oxygène de 1500 ml/min était significativement plus élevée que dans le repos. La noradrénaline plasmatique artérielle pendant l'exercice normoxique à une absorption d'oxygène de 1500 ml/min n'a pas été élevée au-dessus de la concentration de repos. Les résultats sont compatibles avec la suggestion que les concentrations accrues de noradrénaline dans le plasma artériel contribuent à la potentialisation hypoxique de la réponse respiratoire à l'exercice modéré.
Effets des perfusions graduées de monométhylmétacrylate sur la coagulation, les lipides sanguins, la respiration et la circulation. Une étude expérimentale chez les chiens. Chez 4 chiens injectés par voie intraveineuse (i.v.) avec du fibrinogène étiqueté 125I, des plaquettes étiquetées 51Cr et de l'albumine étiquetée 99mTc, et soumis à des quantités successivement croissantes de monométhylmétacrylate infusé par voie intraveineuse, doses correspondant à la dose Les quantités libérées dans la circulation sanguine après l'implantation de ciment acrylique pendant les remplacements totaux de la hanche n'ont pas affecté le mécanisme de coagulation, n'ont pas provoqué la prise de plaquettes et de fibrin dans les poumons, n'ont pas généré d'emboli graisseux et n'ont pas provoqué de dépression de la tension d'oxygène artérielle ou de la pression artérielle. Le monométhylmétacrylate dans le sang entier a été associé à la fois aux cellules sanguines et au plasma.
Influence du pH et de l'hypoxie sur le succès de la défibrillation. Les impressions cliniques sur le problème de la défibrillation pendant les états de déséquilibre acido-basique et d'hypoxie ont été influencées par des études impliquant l'effet de ces perturbations sur le seuil de fibrillation ventriculaire. Sur la base du poids corporel, les besoins en énergie pour la défibrillation chez les chiens normaux ont été comparés aux besoins chez les chiens sujets à des troubles à base d'acide fréquemment rencontrés et à une hypoxémie sévère. Aucune différence significative n’a été trouvée. Soixante-cinq pour cent de tous les animaux de l’étude ont été transformés électriquement avec des niveaux d’énergie faibles à modérés. L'incidence de la reprise spontanée de la circulation après la défibrillation était la plus faible chez les animaux sujets à l'acidose métabolique et à l'hypoxie. Les résultats suggèrent que les altérations du pH et des gaz sanguins, précédemment montrées pour affecter le seuil normal de fibrillation ventriculaire, n'affectent pas de manière significative le seuil normal de défibrillation.
effusion pleurale associée au syndrome de l'aortite. Un patient atteint du syndrome de l’aortite a eu une effusion pleurale qui a diminué mais a réapparu avec une exacerbation des symptômes de l’aortite pendant le traitement antituberculeux. Le caractère du liquide était celui d'un exsudat, et la concentration de glucose était normale. Les caractéristiques cliniques et de laboratoire du cas suggèrent que l'effusion faisait partie du syndrome de l'aortite en soi.
[Transplantation et préservation de la peau typiquement tissulaire dans les brûlures]. Au Département de la chirurgie plastique et des brûlures, Berufsgenossenschaftliche Unfalklinik Ludwigshafen-Oggersheim, une banque de peau avec peau typée a été établie. Le système de stockage consiste en un gel profond à -196 degrés C dans l'azote liquide. La transplantation de peau HL-A a été évaluée du point de vue clinique et histologique. En raison de l'effort nécessaire à une telle entreprise, cette méthode est critiquement réexaminée.
Propriétés de charge des prolactines du fluide pituitaire et amniotique humain. Les points isoélectriques apparents (pI) de la concentration isoélectrique (IF) de la prolactine du liquide hypofysaire et amniotique humain (hPRL), non-iodée et iodée, ont été déterminés. Les mélanges non résolus d'isohormones hPRL hypophysaires E et F, et d'au moins cinq isohormones présentes dans le liquide amniotique, et d'hPRL plasmatique présentent une valeur pI moyenne de 6,5 à 6,7. Les valeurs de pH d'état transitoire observées ou précédemment rapportées pour les composants de l'hPRL varient de pH de 5,9 à 6,8 après correction aux conditions normales. À un pH de 8,1, l'isohormone principale, hPRL-F, porte une charge de 2,2 protons nets par molécule. Les différences de charge nette entre les isohormones E, F et G sont compatibles avec l'acquisition ou la perte de groupes chargés individuels par 20 000 poids moléculaire. Cette charge nette est similaire à celle de la moins prolactine-bioactive principale isohormone de l'hormone de croissance humaine (hGH-B), tandis que l'hGH avec une bioactivité comparable à celle de l'hPRL présente une charge nette de 3,4 unités de valence. Les "grands" isohormones J et H ont augmenté les charges nettes, d'un facteur de 2-3, en proportion directe à leurs augmentations de taille.
Prolactine et hormone de croissance humaine et singe : séparation des formes polymorphiques par focalisation isoélectrique. La faisabilité de l'utilisation de la concentration isoélectrique pour la séparation de l'hormone de croissance de l'hypophyse primate de la prolactine et pour la caractérisation des formes polymorphiques de ces hormones a été explorée. Dans un pH de 3 à 10 gradients, les extraits de l'hypophyse de singe humain et de cynomolgus ont chacun été dissous en 4 composants de l'hormone de croissance et au moins 3 composants de prolactine, comme le montre l'analyse radioimmunitaire. Dans les gradients plus étroits (de 2-3 unités de pH) une plus grande résolution a été obtenue; les principaux composants de l'hormone de croissance étaient bien séparés des principaux composants de la prolactine, mais il y avait une superposition de certains composants mineurs. Une préparation de prolactine humaine partiellement purifiée a été trouvée contenant 4 composants de prolactine, dont l'un avait un rapport prolactine / hormone de croissance de 760. L'hormone de croissance humaine de classe clinique a également été résolue en au moins 5 composants de prolactine et 5 de l'hormone de croissance, dont beaucoup avaient des valeurs pI plus élevées que celles trouvées dans l'extrait de l'hypophyse. Dans les conditions utilisées, à la fois l'hormone de croissance et la prolactine ont été trouvés à être polymorphes par rapport au point isoélectrique. Certains des composants de la prolactine humaine ont été trouvés à contenir moins de 0,2% de l'hormone de croissance par radio-immunoassay. L'hormone de croissance du singe contenant 0,01% de prolactine a été isolée. Ces résultats démontrent que la concentration isoélectrique est utile pour la préparation de l'hormone de croissance et de la prolactine qui sont essentiellement libres les uns des autres. En outre, les formes polymorphiques ont été répétées dans des préparations obtenues par plusieurs méthodes et de 2 espèces différentes, ce qui suggère que ces formes ne sont pas des artefacts.
Observation écologique de la 137Cs-contamination dans le bœuf d'animaux de la région sud-bavière. Certaines configurations climatiques et édaphiques dans les montagnes sous-alpines bavaroises et dans les Alpes favorisent avant tout le développement d'un système d'utilisation des terres et des structures agricoles similaires à celles de la partie nord de la Scandinavie. En 1963/64, les années de la plus haute pollution environnementale à ce jour, nous avons établi dans 600 échantillons de bœuf du cercle ou de l’épaule des bovins mâles et femelles (principalement des bovins de haute montagne) des liens étroits entre la contamination de 137Cs des cultures vertes et les longues précipitations annuelles, ainsi que certaines relations entre la contamination de 137Cs de la viande et les différences dans l’alimentation et l’entretien des animaux. Pendant les saisons estivales (avril-octobre), le bœuf provenant de pâturages avec de fortes précipitations (Alpes) a été contaminé par 137Cs jusqu’à 15 fois plus que celui des animaux confinés. Par conséquent, le taux de 137Cs-contamination dans la viande de bétail pâturage était presque proportionnel aux quantités de précipitations. Lorsque les bovins confinés ont été nourris sur les pâturages à l'automne après la récolte pendant 2 à 3 semaines, une augmentation rapide de la contamination de 137Cs de la viande a été causée au cours de ce temps jusqu'à des valeurs qui dans ce quartier n'étaient autrement observées que chez le bétail paissant. La plus faible teneur en 137Cs dans la viande de bœuf hébergée pendant la saison estivale est due à la variété des aliments pour animaux, qui sont à ce moment-là moins contaminés que les cultures vertes. Au cours de la saison hivernale (de novembre à mars), les taux de contamination les plus élevés dans la viande de bétail confiné (Forêt Bohémique) ou de bétail pâturage (Alpes) ont été mesurés lorsque les animaux de ces districts ont été presque exclusivement nourris avec des aliments provenant de leur propre ferme ou avec de la silage à feuilles. La contamination la plus élevée a été presque régulièrement observée en janvier, février et mars, car généralement pendant ces mois, le premier grain fortement contaminé est nourri. Ici, la viande était souvent encore plus contaminée que celle du bétail. Après la diminution rapide de 137Cs en cas de chute observée dans les années 1964 et 1965, en 1965/66 une dépendance de la contamination de 137Cs du bœuf sur les méthodes d'entretien et d'alimentation pouvait encore être observée dans les cas extrêmes (Alpes, Forêt bavaroise et forêt bœmique); bien que, en général, la viande d'animaux de districts avec des précipitations fortes était légèrement plus contaminée que la viande d'animaux de régions avec moins de précipitations.
bêta-glucuronidase microsomique du foie et UDP-glucuronyltransferase. Les deux UDP-glucuronyltransférase (GT) et bêta-glucuronidase (betaG) ont été analysés dans les microsomes hépatiques non traités. Des conditions d'analyse optimales ont été établies avec des microsomes du foie de rat utilisant le p-nitrophénol (pNP) et son glucuronide (pNPGA) à un pH optimal de GT (7.5) et de bêtaG (4.5). Les activités des deux enzymes ont été comparées en utilisant des microsomes de rats, de souris, de porcs, de bovins et de chevaux, avec le pNP, le pNPGA et la phénolphthaleine comme substrat, en présence de divers cofacteurs et inhibiteurs à pH 7.5 et 4.5. Ces données révèlent des différences prononcées par rapport à l'espèce, au substrat et à d'autres conditions expérimentales, empêchant ainsi l'établissement de conditions optimales générales. Les deux enzymes ont également été testées dans des conditions strictement identiques à l'aide de pNP et de pNPGA et de microsomes hépatiques de rat à pH 7.5 en présence et en absence de diosodium UDP-glucuronate (UDPGA), d'activateurs (ATP;UDP-N-acétylglucosamine) et d'inhibiteurs. Lorsqu'un niveau fonctionnel d'UDPGA a été fourni, les deux enzymes se sont révélées actives dans ces conditions et une interaction conjugation-déconjugation a été indiquée. Les deux processus pourraient être sélectivement et totalement inhibés par Zn2+ et par la saccharolactone. Les résultats suggèrent que les cycles de conjugaison-déconjugation-reconjugation peuvent être opérationnels dans le métabolisme des médicaments in vivo, se déroulant déjà au niveau du réticul endoplasmique du foie.
Aspects biochimiques de la formation d'ammoniac rénal dans l'acidose métabolique. Chez les créatures omnivores, le régime alimentaire est acidogène, en particulier en raison de la teneur en viande, ce qui donne lieu à des acides phosphoriques et sulfuriques, c'est-à-dire à une acidose métabolique. À court terme, les acides métaboliques sont tamponnés par les protéines tissulaires et le bicarbonate (la « réserve alcaline »). À plus long terme, l’acide doit être éliminé, ou neutralisé avec la base qui est également générée à partir de l’alimentation, par la conversion de l’amino-azote alimentaire en ammoniaque. Les dernières étapes de ce processus se produisent dans le rein, qui convertit la glutamine circulante en ammoniaque, et en produits de carbone tels que le glucose et le dioxyde de carbone, par des réactions métaboliques qui s'adaptent pendant l'acidose pour générer plus d'ammoniaque et maintenir une teneur en ammoniaque renale accrue. Les mécanismes complexes qui régissent la formation d'ammoniac, de glucose et de dioxyde de carbone à partir de la glutamine, impliquant les réactions des acides aminés, le cycle de l'acide tricarboxylique et la gluconeogénèse, sont examinés.
Études sur le mécanisme des modifications de l'activité sérique et hépatique de la gamma-glutamil transpeptidase. I. Cholestase extrahépatique expérimentale chez le lapin. L'activité sérique, hépatique et rénale de la gamma-glutammyl transpeptidase (GGT) a été étudiée chez quatre groupes de lapins: les lapins de contrôle, les lapins atteints de cholestase extrahépatique obstructive, les lapins atteints d'anurie obstructive et les animaux atteints de cholestase extrahépatique obstructive combinée et d'anurie obstructive. La GGT sérique a été essentiellement augmentée chez les lapins atteints de cholestase extrahépatique obstructive, montrant des valeurs de pointe dans le groupe cholestase combinée + anurie obstructive, et des valeurs pratiquement normales chez les animaux atteints d'anurie. La GGT hépatique a été augmentée dans les deux groupes de cholestase, mais l'augmentation a été moins prononcée que l'augmentation de la GGT sérique et il n'y a pas eu de corrélation entre eux. Dans les deux groupes anuriques, la GGT rénale a été réduite, probablement à la suite de la synthèse enzymatique inhibée secondaire aux conditions modifiées pour une fonction rénale adéquate. Les résultats obtenus suggèrent une implication rénale probable dans la formation du niveau d'activité du sérum GGT.
Études sur le mécanisme des modifications de l'activité sérique et hépatique de la gamma-glutamil transpeptidase. Porphyrie d'hexachlorobenzène expérimentale chez le lapin. Le mécanisme responsable des modifications de l'activité sérique et hépatique de la gamma-glutamil transpeptidase (gamma-GT) a été étudié dans un modèle de porphyrie expérimentale de l'hexachlorobenzène chez le lapin. La porphyrie a été suivie de l'administration d'hexachlorobenzène à des doses de 280 mumol - 1 kg de poids corporel, qui ont été administrés quotidiennement à travers un tube gastrique sur une période de 20 jours. L'activité sérique gamma-GT et l'activité des enzymes lysosomiques bêta-N-acétylglucosaminidase et alpha-mannosidase ont été augmentées, alors que l'aspartate L: 2-oxoglutarate aminotransferase et L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase et L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase n'ont pas été modifiées. Il y a eu une augmentation considérable de la protéine microsomique du foie, de la gamma-GT, du cytochrome P-450, de l'anilinehydroxylase, de l'aminopyrine-déméthylase et de la synthase de l'acide delta-aminolevulinique. Dans le foie, le gamma-GT a été détecté dans les microsomes ainsi que dans le cytoplasme où l'activité enzymatique était plus élevée. Le coefficient de corrélation élevé entre le gamma-GT du foie, le cytochrome P-450 et la synthase de l'acide delta-aminolevulinique témoigne d'une formation de gamma-GT induite par l'hexachlorobenzène dans le foie. Une corrélation statistiquement significative entre l'activité sérique et hépatique gamma-GT a également été trouvée. Ces données suggèrent fortement que l'augmentation de l'activité sérique gamma-GT peut résulter de l'induction de l'enzyme dans le foie.
Changements de l'érythrocyte 2,3 diphosphoglycérate chez les femmes après un exercice maximal à court terme. 15 femmes non formées ont été soumises à un test de jogging pour déterminer l'influence de l'exercice maximal sur la synthèse de l'érythrocyte 2,3 DPG. Bien qu'il y ait eu une augmentation de 9,8% de la teneur en 2,3 DPG après l'exercice, il y a eu une augmentation concomitante de 9,4% du niveau d'hémoglobine; par conséquent, lorsque 2,3 DPG est exprimé en proportion à l'hémoglobine (voir l'article), il n'y a pas eu de changement significatif en raison du stress de l'exercice. Il a été suggéré que trois facteurs additifs produits pendant l'exercice intense; diminution du pH; augmentation de la concentration d'hémoglobine; et augmentation de la production de CO2 résultent dans l'inhibition du sous-produit de la synthèse de 2,3 DPG. Il est conclu que 2,3 DPG ne fournit pas un avantage physiologique dans l'adaptation du système de transport de l'oxygène à l'exercice.
Hydroxylation de l'acide p-Coumaric par des chloroplastes illuminés. Le rôle du suroxyde. Les chloroplastes isolés à partir de feuilles d'épinards (Beta vulgaris L. ssp. vulgaris) ne catalyse pas l'hydroxylation de l'acide p-coumarique dans l'obscurité à moins qu'un réducteur (comme l'ascorbate, le NADH ou le NADPH) ne soit ajouté. Les chloroplastes isolés à partir de feuilles d'épinards (Beta vulgaris L. ssp. vulgaris) ne catalyse pas l'hydroxylation de l'acide p-coumarique dans l'obscurité à moins qu'un réducteur (comme l'ascorbate, le NADH ou le NADPH) ne soit ajouté. La superoxide dismutase n'a aucun effet sur cette réaction. Les chloroplastes illuminés catalyse l'hydroxylation en l'absence de réducteur ajouté. Cette réaction est complètement inhibée par la superoxide dismutase, mais la catalase a peu d'effet. L'hydroxylation à la lumière et l'hydroxylation à l'obscurité en présence de réducteurs sont inhibées par le diéthyldithiocarbamate, EDTA, le cyanure et le 2-mercaptoéthanol. Il est proposé que l'O-2- généré par des chloroplastes illuminés est impliqué dans la fourniture d'un réducteur à l'enzyme phénolase.
Identification des sites de liaison au chlorure dans l'hémoglobine par des études de quadrupole-relaxation par résonance magnétique nucléaire des digesteurs d'hémoglobine. Les études de résonance magnétique de 35Cl minus-nucléaire (RMN) indiquent que divers digestifs d'hémoglobine humaine avec carboxypeptidase A et B, ou une combinaison des deux, peuvent être utilisés pour l'identification des sites de liaison au chlore. Tous les produits digestifs contiennent, comme l’hémoglobine elle-même, au moins deux classes de sites liants, l’un d’affinité élevée, l’autre de faible affinité. La dépendance du pH de l'excès de largeur de ligne du signal 35Cl moins NMR indique que dans les digestors simples avec soit carboxypeptidase A ou B, le chlorure est lié avec une affinité élevée à ou près de His-beta146-Asp-beta94 et à ou près de Val-alpha1-Arg-alpha141. Les sites d'affinité élevée montrent, dans le cas des digesteurs simples, une forte liaison d'oxygène qui est perdue dans les formes digérées avec à la fois carboxypeptidase A et B ; cette liaison peut donc être corrélée à la présence de changements de conformation. Les phosphates organiques, tels que l'hexaphosphate d'inositol, montrent la concurrence pour certains des sites de liaison du chlorure de haute affinité dans l'hémoglobine et dans les digestifs simples. Cette concurrence est également perdue dans les hémoglobines doublement digérées.
Le gradient de pH interne alcaline, sensible au découpler et à l'inhibiteur de l'ATPase, dans la croissance de Clostridium pasteurianum. Le pH intracellulaire a été mesuré en cultivant Clostridium pasteurianum avec et méthode de distribution de l'équilibre acide-base.1. [14C]Diméthyloxazolidinedione, [14]méthylamine et [14C]acide acétique ont été utilisés comme «deltapH-indicateurs». Au cours de la croissance, le pH extracellulaire a diminué de 7,1 à 5,1 ; en même temps, le pH intracellulaire a changé de 7,5 à 5,9. Ainsi, le pH intracellulaire était plus alcalin que le pH extracellulaire de 0,4 à 0,8 unités de pH. Ce gradient de pH (alcaline intérieure) a été aboli par le conducteur proton carbonylcyanide m-chlorophenylhydrazone et l'inhibiteur ATPase N,N'-dicyclohexylcarbodiimide. Le gradient du pH ne pouvait pas être démontré dans les cellules épuisées d'un substrat énergétique. Ces résultats suggèrent que le gradient du pH est formé par une extrusion d'ATPase de protons provenant des cellules plutôt que par un potentiel de Donnan. La croissance de l'organisme a été inhibée par de faibles concentrations de carbonylcyanide m-chlorophénylhydrazone (5 mM) et de dicyclohexylcarbodiimide (5 mM). Cette découverte suggère que le gradient du pH est essentiel pour la cellule en croissance car il peut être nécessaire pour l'accumulation de substrat et d'autres types de processus de transport.
D-alanyl-D-alanine carboxypeptidase sous forme bactérienne et sous forme L de Proteus mirabilis. Les membranes de la forme bactérienne et les L-formes stables et instables de Proteus mirabilis contiennent LD et DD-carboxypeptidase. La DD-carboxypeptidase est inhibée non concurrentiellement par la pénicilline G. L'enzyme de la forme bactérienne est très sensible à la pénicilline (Ki - 4 X 10(-9) M pénicilline G). L'inhibition n'est réversible que partiellement par un traitement par pénicillinase ou par dialyse contre tampon. En revanche, la DD-carboxypeptidase de la forme L instable, cultivée en présence de la pénicilline, est 175 fois moins sensible à la pénicilline (Ki = 7 X 10(7) M pénicilline G). L'inhibition est complètement inversée par la pénicillinase ou la dialyse. Après inhibition par la pénicilline et réactivation ultérieure, la sensibilité à la pénicilline de la DD-carboxtpeptidase bactérienne est similaire à la sensibilité de l'enzyme de la forme L instable. L'hypothèse est proposée que P. mirabilis contient deux DD-carboxypeptidases de sensibilité différente à la pénicilline et avec différents mécanismes de liaison à la pénicilline. La synthèse du peptidoglycan dans les parois cellulaires de la L-forme instable est probablement réalisée à l'aide d'une seule DD-carboxypeptidase, c'est-à-dire de la L-forme. l'enzyme complètement réactivable avec la sensibilité inférieure à la pénicilline.
Le foie de pigeon au dessus de la kinase. La base structurelle et cinétique de la régulation du NADPH. La kinase NAD a été purifiée du foie de pigeon par une procédure améliorée qui comprenait la chromatographie sur la phosphocellulose. La préparation résultante était homogène selon l'électrophorèse au gel, mais l'électro-focus a donné des indications d'hétérogénéité. L'enzyme semble avoir un poids moléculaire de 270000, et se composer de sous-unités de poids moléculaire de 34000; il peut donc être un octomère. Des études cinétiques sur un large éventail de concentrations de substrat ont révélé des déviations du comportement Michaelis-Menten avec le substrat NAD+ ; celles-ci ont été interprétées provisoirement en termes d'interactions homotropes négatives entre sites de liaison identiques, puisque les études d'inactivation thermique et chimique n'ont révélé aucune preuve de plus d'un type de site catalytique. L'importance de la cinétique et du type d'inhibition produit par le NADPH est discutée en termes de régulation de l'activité de la NAD kinase in vivo.
Changements d'ions d'hydrogène et comportement contractile dans le cœur du rat perfusé. L'effet des altérations acido-basiques a été analysé en utilisant des cœurs de rat isolés perfusés à une pression de perfusion coronaire constante, et stimulés à contracter à un rat constant. La quantité de raccourci dans l'axe principal et son dérivé a été mesurée pour évaluer la contractilité du myocarde. Les modifications « respiratoires » et « métaboliques » ont affecté le comportement contractile dans la même mesure. Dans la gamme physiologique étudiée par nous, l'acidose déprime et l'alcose augmente la contraction du myocarde. Cependant, l'acidose semble supprimer la contractilité plus que l'amélioration produite par le même changement de pH vers le côté alcalotique. Lorsque la quantité d'abréviation ou max dl/dt a été conçue en fonction de l'activité des ions d'hydrogène (aH+), une corrélation linéaire a été obtenue, soit avec des altérations induites par l'acide-base purement "métabolique" ou "respiratoire" (coefficients de corrélation supérieurs à -.95; P inférieur à .01). Nos résultats suggèrent que dans la gamme étudiée par nous, la contraction du cœur du rat perfusé suite à des altérations acido-basiques, est une fonction linéaire de l'activité des ions d'hydrogène.
Changements de l'EEG et de l'administration veineuse pulmonaire pendant une charge de protéines chez les patients atteints de cirrhose. 21 patients atteints de cirrhose du foie et 24 patients contrôlés ont été étudiés avant et après une charge de protéines (120 g de protéines par jour pendant une semaine). Un EEG a été enregistré et une évaluation visuelle du modèle de fréquence a été effectuée. L'admixtion veineuse a été estimée pendant l'hyperoxie. Selon le schéma de fréquence de l'EEG, le groupe de patients atteints de cirrhose a été subdivisé en ceux avec un ralentissement de l'EEG après la charge des protéines (n = 7) et ceux sans (n = 14). Les résultats suivants ont été obtenus: 1) Les gaz sanguins artériels au repos n'ont pas changé dans les deux groupes. 2) Il y a eu une augmentation significative de l'AaD02 (différence entre l'alvéolaire p02 et l'artère périphérique p02) dans la cirrhose et les contrôles. 3) L'augmentation de l'AaD02 était significativement plus importante chez les cirrotiques montrant un ralentissement de l'EEG par rapport à ceux sans EEG - ralentissement ou aux contrôles. 4) L'admission veineuse fractionnelle a augmenté de manière significative chez les cirrotiques montrant un ralentissement de l'EEG. Il n'y a pas eu de changement significatif chez les patients qui n'ont pas montré de changements dans l'EEG ou dans les contrôles.
Une évaluation des facteurs affectant la bioanalyse in vitro de l'érythropoïétine. Deux aspects principaux de l'analyse in vitro des cellules hépatiques foetales de souris pour le facteur de stimulation de l'érythrée (FES) dans le sérum humain ont été étudiés. Il a été démontré que le processus d'extraction de l'hématome donne une récupération spécifique et quantitative de l'hématome étiqueté 59Fe à partir de l'hémoglobine, confirmant ainsi que le matériau analysé dans le sérum humain stimule la synthèse de cette protéine. La procédure d'extraction peut être considérablement simplifiée par le mélange préalable des réactifs sans influencer de manière significative les résultats. Plusieurs composants sériques (citrate, testostérone, B12, acide folique et fer) ont été étudiés sur une gamme de concentrations pour les effets possibles sur les cultures. Généralement, seuls de petits effets sur la synthèse de l'hématome ont été observés. Il est conclu que les variations des niveaux de ces facteurs dans le sérum chez les patients traités ne produiront aucune modification significative des concentrations estimées de FSE.
[Synthèse des isoindolines N-substituées]. Certains dérivés de l'isoindoline ont été préparés afin de tester leur activité cardiovasculaire. Des tests pharmacologiques ont montré que certains des composés avaient une activité alpha-bloquante et coronarodilatatrice modérée, tandis que d'autres avaient une activité anesthésique locale.
[Mécanismes de l'action thermogénique de la noradrénaline lors de l'adaptation au froid]. Chez les rats blancs adaptés et non adaptés au froid, la dynamique RQ lors de l'exposition au froid, la noradrénaline et l'administration d'agent de blocage ganglionaire ont été étudiées. Le RQ des animaux adaptés dans des conditions thermoneutrales a été montré être légèrement plus élevé que chez les rats de contrôle; les injections de noradrénaline de 0,5 mg/kg ont induit une diminution claire du RQ dans le premier et n'ont pas influencé le RQ de ces derniers. L'exposition au froid a été suivie d'une diminution de la RQ dans les deux. L'administration d'agent de blocage ganglionaire a diminué le RQ chez les animaux adaptés et l'a empêché de tomber dans le contrôle de ceux-ci. La noradrénaline est censée être le principal, mais pas le seul facteur activant la lipolyse chez les animaux adaptés au froid.
Base chromosomique de la merosygosité dans un mutant partiellement déployé de Pneumococcus. Un mutant résistant aux sulfonamides du pneumocoque, sulr-c, affiche une instabilité génétique, se séparant régulièrement au type sauvage. Les extraits d'ADN des dérivés de la souche possèdent des activités de transformation pour les allèles de type mutant et de type sauvage, établissant que la souche est un diploïde partiel. La liaison de sulr-c à strr-61, un marqueur chromosomique stable, a été établie, définissant ainsi un locus chromosomique pour sulr-c. L'ADN isolé des cellules sulr-c transforme deux souches de récepteurs mutants à la même faible efficacité qu'un récepteur de type sauvage, bien que la propriété mutante de ces souches les rende capables d'intégrer les marqueurs de donneur classiques de « faible efficacité » aussi efficacement que les marqueurs de « haute efficacité ». Par conséquent, sulr-c doit avoir une base différente pour sa faible efficacité que de faire des mutations de point de faible efficacité classiques. Nous suggérons que l'ADN dans la région de la mutation sulr-c a une anomalie structurelle qui conduit à la fois à sa ségrégation fréquente pendant la croissance et à sa difficulté à médier efficacement la transformation génétique.
Recombination comme condition pour la ségrégation d'un mutant partiellement diploïde de Pneumococcus. Des conditions sont décrites dans lesquelles la souche de mutant pneumocoque sulr-c, résistante au médicament sulfanilamide, donne lieu à des ségrégants sensibles résistants à l'acide nitrobenzoïque à une fréquence constante avec le temps. Cette fréquence ségrégante est considérablement augmentée lors de l'exposition des cellules à des doses de lumière ultraviolette ou de mitomycine C qui permettent la survie de 50% à 90% des cellules. Le traitement avec de l'orange acridique diminue la fréquence de ségrégation. À partir des influences connues de ces trois agents sur la recombination génétique, nous proposons qu'un événement de recombination est nécessaire dans la génération de ségrégants. - Pendant une période d'incubation suivant le traitement avec la lumière ultraviolette ou la mitomycine C, la division cellulaire reprend et la fréquence ségrégante initiale est restaurée. Ainsi, les ségrégants potentiels sont soit incapables de se reproduire en l'absence de sélection, soit ils sont sous-représentés parmi les cellules qui se divisent peu de temps après le traitement. - Si la mutation sulr-c est introduite dans une souche pneumocoque mutante qui manque d'activité d'exonuclease dépendante de l'ATP et déficiente en recombination avec l'ADN transformant, les fréquences ségrégantes ne sont pas affectées. Ce fait peut indiquer des limites sur le type d'événement de recombination responsable de la ségrégation.
Implication de l'intestin grêle dans la maladie systémique des mastocytes. Un patient est rapporté avec l'infiltration des cellules souches de l'intestin grêle en l'absence de l'implication cutanée caractéristique de la maladie des cellules souches. Elle a également eu une atrophie villique subtotale réactive à un régime sans gluten. Des critères pour le diagnostic de la maladie des cellules mastiques de l'intestin grêle sont proposés. La littérature de la maladie des mastocytes du petit intestin est examinée et la relation avec la maladie coeliaque est discutée.
pH gastrique et microflore des nourrissons normaux et diarrhéiques. La microflore et le pH du contenu gastrique ont été déterminés chez les nourrissons allaités et nourris en bouteille, chez les nourrissons bien nourris avec diarrhée aiguë et chez les nourrissons atteints de diarrhée chronique et de malnutrition protéinocalorique. Le dernier groupe de nourrissons a été réévalué après la récupération de la diarrhée et de la malnutrition protéinocalorique. Un effet bactéricide de pH inférieur à 2-5 a été observé. Les contrôles nourris en bouteille avaient de faibles valeurs de pH et de faibles concentrations bactériennes, tandis que les nourrissons atteints de diarrhée chronique et de malnutrition calorique-protéinée avaient des valeurs de pH élevées et une surcroissance bactérienne, essentiellement de bacilles gramnégatives. Après la récupération, la seule altération restante était l'isolation fréquente de champignons de levure à faibles concentrations. Les nourrissons atteints de diarrhée aiguë, à l'exception de l'isolement plus fréquent de champignons à la levure, n'ont présenté aucune modification; cela semble indiquer que les altérations du pH et la surcroissance des bacilles gramnégatives se sont produites au cours de l'évolution de la maladie vers un état chronique. Les nourrissons normaux allaités avaient des concentrations d'ions d'hydrogène similaires à celles du groupe de la diarrhée chronique, mais sans surcroissance de bacilles gramnégatives, ce qui suggère que d'autres facteurs, en plus du pH, régulent la croissance bactérienne dans le contenu gastrique de ces groupes de nourrissons.
[Effet bifasique (formant des ulcères et prévenant les ulcères) de l'adrénaline chez le rat]. L'ulcération gastrique induite par l'adrénaline a été étudiée chez le rat. L'adrénaline à fortes doses a provoqué des ulcères gastriques, qui ont été complètement bloqués par un prétraitement avec des alpha-bloquants (phénoxybenzamine, dibenamine), mais pas par un prétraitement avec du propranolol ou de l'atropine, ni par une vagotomie, une hypophysectomie ou une adrénalectomie. Après l'administration successive d'adrénaline, une fois par jour pendant 7 jours, cependant, aucun ulcère gastrique n'a été observé. La récupération de l'action ulcérogène de l'adrénaline a été observée après 4 semaines d'abstinence. Le prétraitement avec une petite dose d'adrénaline inhibe l'action ulcérogène d'une dose élevée d'adrénaline. Le prétraitement avec la reserpine, le pyrogallol ou l'iproniazide a inhibé l'action de l'adrénaline. On conclut que l'adrénaline a un effet biphasé sur l'ulcération gastrique, l'action ulcérogène est due à son action alpha et l'effet antiulcérogène est dû au développement de la tachyphylaxie.
[Comparation des effets du médicament sur le côlon isolé du rat et du duodénum]. L'adrénaline et l'isoproterenol ont provoqué une relaxation presque maximale du côlon, même en petites doses, tandis que l'augmentation des doses a entraîné une relaxation plus grande dans le duodénum. Dans le côlon, ces médicaments ont empêché, dans une large mesure, la contraction induite par l'acétylcholine (ACh) et la sérotonine, mais dans le duodénum étaient totalement inefficaces. Dibenamine et propranolol ont réduit la relaxation induite par l'adrénaline et l'isoproterenol dans le duodénum, bien que le propranolol ait diminué la relaxation provoquée par l'isoproterenol. L'atropine a empêché la contraction induite par l'AC dans le côlon et le duodénum de la même manière. Après l'acide 2-bromolysergique diéthylamide, la contraction duodénale causée par ACh ou la sérotonine a diminué de plus de 70%; cependant, la contraction du côlon n'a pas été significativement inhibée. Methysergide a eu des effets similaires, mais à un degré moindre. Dans le liquide de baignade sans calcium sans l'ajout de Na2EDTA, ACh et prostaglandine E1 a provoqué une contraction dans le côlon, mais pas dans le duodénum.
La monoamine oxydase (XXXVI) Caractéristiques de l'oxydase de benzylamine dans le sérum du chien]. Les propriétés enzymatiques de la monoamine oxydase (MAO) dans le sérum de chien ont été étudiées et les résultats suivants ont été obtenus. Certaines des propriétés enzymatiques de la MAO dans le sérum du chien différaient de celles de la MAO mitochondriale. Lorsque le sérum du chien a été fractionné par le sulfate d'ammonium, les protéines ont été concentrées en deux fractions, telles que 25 environ 33% et 67 environ 80% de la fraction de sulfate d'ammonium saturé, tandis que l'activité MAO a été concentrée dans 40 environ 50% de la fraction de sulfate d'ammonium saturé. La vitesse de réaction de la MAO dans le sérum du chien a été trouvée proportionnelle à la concentration enzymatique. Le pH optimal de la MAO dans le sérum du chien était de 7,0, ce qui diffère de celui de la MAO dans le sérum du lapin (pH 8,0). Le tampon Tris-HCl a fortement inhibé l'activité de la MAO dans le sérum du chien. Lorsque la benzylamine a été utilisée comme substrat, l'activité la plus élevée a été obtenue par rapport à l'autre substrat utilisé. Les activités avec la butylamine, l'amylamine, la bêta-phénylétylamine et la tyramine ont montré environ 30%, tandis que la tryptamine et la sérotonine ont montré 3 environ 10%, par rapport à celle avec la benzylamine comme substrat. La valeur de pI50 du catron était d'environ 3 X 10(-6) M et celle de l'harmaline était d'environ 3 X 10(-5) M, mais la pargyline n'inhibe pas l'activité de la MAO dans le sérum du chien à une concentration de 1 X 10(-4) M.
[Utilisation combinée des dérivés du bucolome et de la pyrazolone (1). Activités pharmacologiques et concentration sanguine). Une combinaison de deux ou plusieurs médicaments peut exercer une interaction entre les médicaments, auquel cas l'effet peut être potentialisé ou antagonisé. De tels effets synergiques sont bien connus dans le cas du pyrabital (barbital + aminopyrine) ou de l'irgapyrine (phénylbutazone + aminopyrine). Le Bucolome (BCP), un agent anti-inflammatoire non stéroïdien, a la structure chimique d'un barbiturate et ressemble également à la formule de la féylbutazone. Ainsi, l'influence de la combinaison de BCP sur les activités pharmacologiques de divers dérivés de la pyrazolone a été examinée. BCP a potentialisé les effets analgésiques et antipyrétiques de la 4-aminoantipyrine (4A), de la méthylaminoantipyrine (MA), de l'aminopyrine (AM) et de l'isopropylaminoantipyrine (IPA), qui ont été remplacés par le groupe alkylamino à la position 4 de l'anneau de pyrazolone. Cette potentialisation a eu lieu lorsque la dose de BCP a dépassé celle des pyrazolones, et a été particulièrement marquée lorsque le ratio de combinaison de BCP a dépassé celui des pyrazolones, et a été particulièrement marquée lorsque le ratio de combinaison de BCP et de pyrazolone était de 2:1 mola. Les effets analgésiques de l'antipyrine (AN), de l'isopropylanthypyrine (IP) et de l'aminopropylone (AP), qui ont été remplacés par le groupe alkylique ou le groupe aminoacylamine à la position 4, n'ont pas été potentialisés par le BCP dans aucun rapport de combinaison. La plupart des pyrazolones ont montré une toxicité aiguë additive en association avec BCP, mais les toxicités aiguës de 4A et AM, qui ont été potentialisées par des effets analgésiques, ont été diminuées et antagonisées en association avec BCP. La concentration plasmatique de l'AM a été augmentée et prolongée par le BCP, tandis que celle de l'IP est restée beaucoup la même. Ces résultats suggèrent que les activités pharmacologiques sont associées à certaines interactions moléculaires entre le BCP et les pyrazolones, qui sont remplacés par le groupe alkylamine à la position 4 de l'anneau de pyrazolone.
[Utilisation combinée des dérivés du bucolome et de la pyrazolone (II). Formation complexe due à l'interaction entre le bucolome et les pyrazolones]. Nous avons déjà rapporté que le bucolome (BCP), un agent anti-inflammatoire non stéroïdien, renforce considérablement les effets analgésiques et antipyrétiques des pyrazolones qui sont remplacés par le groupe alkylamine à la position 4 de l'anneau de pyrazolone. La chimie physique et quantique ont été appliquées au mécanisme de cette action synergique. La solubilité de BCP a été nettement augmentée proportionnellement à l'augmentation de la concentration d'aminopyrine (AM), mais pas en association avec l'isopropylanthypyrine (IP). La liaison de la BCP à l'albumine sérique bovine a été légèrement inhibée par l'AM, mais pas par l'IP. Le mélange d'AM et de BCP dans les supports aquatiques a généré une absorption optique dans le spectre différentiel ultraviolet, en raison de l'interaction de transfert de charge. Les résultats du spectre infrarouge ou NMR ont démontré la formation d'une liaison à l'hydrogène dans les médias non aquatiques entre BCP et AM. Du calcul de la charge sur un atome, de l'énergie de l'orbital moléculaire le plus élevé occupé et de la densité d'électrons frontalière, BCP est considéré comme un bon accepteur d'électrons. Les unités bêta de Mho des pyrazolones ont été trouvées en corrélation avec le coefficient de potentiation de l'activité analgésique dans les médicaments de combinaison. Ces résultats suggèrent que la formation complexe entre le BCP et les pyrazolones est un facteur important pour la synergie d'action et est due à l'interaction de transfert de charge et à la liaison à l'hydrogène des deux molécules.
L'activité de la fructose 1,6 bisphosphate aldolase de l'espèce Rhizobium. L'aldolase FDP a été trouvée présente dans les extraits sans cellules de Rhizobium leguminosarum, Rhizobium phaseoli, Rhizobium trifolii, Rhizobium meliloti, Rhizobium lupini, Rhizobium japonicum et Rhizobium des espèces d'Arachis hypogaea et de Sesbania cannabina. L'enzyme dans 3 espèces représentatives a une activité optimale à un pH de 8,4 dans le tampon veronal de 0,2M. L'activité de l'enzyme a été complètement perdue par traitement à 60 degrés C pendant 15 min. Les valeurs de Km étaient dans la plage de 2,38 à 4,55 X 10(-6)M FDP. Les agents chélateurs métalliques inhibent l'activité des enzymes, mais les ions métalliques monovalents ou bivalents n'ont pas stimulé l'activité. Les ions métalliques bivalents étaient en général plutôt inhibiteurs.
Prévention de l'agglutination cellulaire et de la compétence dans une souche génétiquement transformable de Pneumococcus par D-glucosamine et D-galactosamine. En présence des amino-sucres D-glucosamine et D-galactosamine aucune compétence spontanée ne pouvait être observée dans la souche hautement transformable R6bd de Pneumococcus ou elle a été diminuée par plusieurs ordres de magnitude. L'inhibition de la compétence la plus élevée a été détectée lorsque l'amino-sucre à une concentration de 5 mg/ml du milieu a été ajouté non seulement à la transformation, mais aussi au milieu de pré-transformation. Après une croissance de 150 min dans le milieu de transformation en présence du sucre aminé, un nombre de cellules 3 à 4 fois plus important (en tant que nombre viable) pouvait être détecté par rapport au contrôle sans le sucre aminé. Il a été constaté microscopiquement que le sucre aminé empêche l'agglutination naturelle, qui se produit normalement dans la culture compétente. Le rôle des déterminants de sucre aminé spécifiques pour lier le facteur de compétence sur la surface cellulaire et l'effet inhibiteur résultant de ces sucres sur le développement de la compétence sont discutés.
Effet de certaines aldoses sur la croissance de Saccharomyces cerevisiae inhibée par le molybdène. L'effet inhibiteur des ions de molybdène sur la croissance des levures à un pH de 5,5 a été constaté être diminué par des aldoses dans l'ordre suivant: D-talose plus grande que L-mannose plus grande que L-ribose plus grande que D-lyxose plus grande que L-galactose plus grande que L-arabinose plus grande que L-glucose plus grande que L-xylose. Les concentrations accrues de molybdène ont entraîné des changements morphologiques dans les cellules de levure. Les cellules cultivées dans ces conditions étaient plus petites, avaient des murs plus épais et formaient des clusters.
Propriétés de transport des vésicules de membrane d'Acholeplasma laidlawii. Caractéristiques cinétiques et spécificité du système de transport du glucose. Le système de transport de glucose des vésicules de membrane isolées d'Acholeplasma laidlawii est saturable, avec un Km de 21,2 mum et V de 0,68 nmol min-1 (mg de protéine)-1. Le processus est dépendant du pH et une rupture se produit dans la parcelle d'Arrhenius à 15 degrés C. Les substrates exogènes n'ont pas stimulé le transport du glucose probablement en raison de leur incapacité à pénétrer dans les vésicules de membrane. 3-O-méthylglucose et 6-déoxyglucose inhibent concurrentiellement le transport du glucose. Le maltose inhibe le transport du glucose de manière non compétitive. Ces sucres ont également déclenché l'efflux de glucose des vésicules de membrane préchargées.
Transport de 4-déoxy- et 6-déoxy-D-glucose dans la levure de Baker. 4-déoxy-D-glucose (4-dglc) et 6-déoxy-D-glucose (6-dgcl) ont été préparés par hydrogénolyse catalytique des dérivés de déoxyodo correspondants avec du tritium gazeux. Les deux sucres sont transportés dans Saccharomyces cerevisiae à la fois par le glucose constitutif et le porteur de galactose inductible. Les ions d'uranium sont des inhibiteurs puissants. Le pH optimal dans les cellules non induites est de 5,5 pour les deux sucres, les énergies d'activation apparentes (entre 15 et 35 degrés C) sont respectivement de 25,1 kJ / mol et de 16,5 kJ / mol. La concentration intracellulaire à l'état stable des deux sucres est inférieure à celle extracellulaire (pas de transport en hauteur). Aucun d'entre eux n'est un substrat d'hexokinase de levure. 4-Deoxy-D-glucose subit une conversion sensible au dinitrophénol en un métabolite inconnu qui n'est pas phosphorylé et peut représenter l'un de ses produits d'oxydation.
L'acide gluconique est produit par le pénicillium puberulum. Vingt-cinq espèces de pénicillium isolées du sol égyptien ont été examinées pour leur capacité à produire de l'acide gluconique dans la culture de surface. Parmi les huit espèces capables de produire de l'acide gluconique, Penicillium puberulum a donné le rendement maximal (91% d'acide gluconique à partir de glucose après 7 jours de fermentation avec 3% de CaCO3). Le pepton était la meilleure source d'azote pour la fermentation acide et le glucose était supérieur au saccharose. L'ajout de faibles concentrations de KH2PO4 et MgSO4 - 7 H2O stimulé production d'acide. Un pH initial de 6,1 était le plus favorable pour l'accumulation d'acide et l'ajout de CaCO3 était nécessaire pour la production maximale d'acide.
Une méthode simple d'isolation et de purification des cultures de champignons déchirants. Une méthode simple d'isolation et de purification des cultures de champignons supérieurs, principalement des champignons à décomposition de bois, sans exigences particulières pour la présence de nutriments contenant de l'azote est décrite. Les parties des corps fruitiers, des spores ou du bois infecté sont inoculées sur les plats Petri avec un médium d'agar de la composition suivante: 1,0 g KH2PO4, 0,2 g MgSO4 - 7 H2O, 0,1 g caSO4, 0,01 g Fe2(SO4)3, 10,0 g de glucose, eau du robinet à 1 litre; 20,0 g d'agar. Ce milieu ne convient pas à la plupart des contaminants mais l'hyphae fongique surchauffe toute la surface du plat afin qu'une culture purifiée puisse être obtenue à partir de parties éloignées du site d'inoculation.
[Études sur le bypass pulmonaire cardiaque primant de faible volume (transl de l'auteur)]. Ce rapport concerne la faisabilité de la circulation extracorporale de primage à faible volume. À travers cette étude, l'oxygénateur de bulle avec l'échange de chaleur de Zuhdi a été utilisé. L'hypothermie modérée avec refroidissement de surface et perfusion d'hémodilution avec 5% de D/W a été évaluée chez 32 chiens mongrels et 16 cas cliniques de cœur ouvert. Les résultats obtenus ici ont été les suivants: 1) La réduction de la température corporelle par le refroidissement de surface avant le bypass a fourni un refroidissement plus uniforme que le refroidissement du noyau par le simple bypass partiel à faible débit. 2) En ce qui concerne la charge cardiaque sur le retour de l'ensemble du perfusat du circuit au patient, environ 20 ml/kg de 5 pour cent D/W était réalisable comme solution de primage. 3) Pour réduire la viscosité du sang, la technique d'hémodilution avec 5 pour cent de D / W était supérieure, et l'effet d'hémodilution pendant les périodes post-opératoires était temporaire. 4) Le volume de lactate excédentaire postulé par Huckabee était un indice disponible pour évaluer l'acidose métabolique pendant la circulation extracorporale. 5) Avec l'aide du refroidissement de surface, l'équilibre acido-basique pendant la perfusion a été maintenu dans une moindre mesure que celui du refroidissement du noyau uniquement. 6) Cette étude a indiqué que la perfusion à faible primage en association avec l'hypothermie de refroidissement de surface était une technique fiable pour l'opération cardiaque ouverte et peut être appliquée dans une perfusion plus prolongée.
[Études sur la circulation extracorporale avec une hémodilution de grand volume à l'aide de la solution de lactate ringer et du dextran à faible poids moléculaire: altérations de l'équilibre acido-basique associées à une hémodilution intentionnelle (transl de l'auteur)]. Vingt chiens de mongrel, pesant entre 7,5 et 13,0 kg, ont été utilisés pour étudier les limites de pourcentage admissibles pour l'hémodilution en utilisant une machine cardio-pulmonaire à réservoir à double hélicoïde qui a un volume de primage de 1 100 ml. Dans les groupes de 40 et 50 pour cent d'hémodilution intentionnelle par 30 minutes de circulation extracorporale, une anémie remarquable était inévitable et la récupération était extrêmement lente, en particulier dans le groupe de dilution de 50 pour cent. Dans les groupes de 40 et 50 pour cent d'hémodilutions intentionnelles par circulation extracorporale de 30 minutes, une acidose métabolique a été observée. Dans le groupe de 50% d'hémodilution intentionnelle, aucune amélioration de l'acidose métabolique n'a été observée même après la perfusion. Lorsque le bicarbonate de sodium a été administré au groupe à 40 % d'hémodilution, des altérations minimales de l'équilibre acido-basique et des électrolytes sériques ont été observées pendant et après la perfusion extracorporale. Lorsque le bicarbonate de sodium a été administré au groupe à 50 % d'hémodilution, l'acidose métabolique était plus évidente que dans le groupe à 40 % d'hémodilution, accompagnée d'une augmentation de la concentration de sodium sérique et d'une diminution de la concentration de chlorure sérique. Ces données qualifient l'utilisation d'une hémodilution intentionnelle de 40 % à l'aide de la solution de Lactate Ringer ou du dextran à faible poids moléculaire pour une circulation extracorporale de 30 minutes lorsque le bicarbonate de sodium est administré en quantités suffisantes.
Purification et caractérisation de la phosphodiestérase du venin de Crotalus. Une procédure pour la purification de la phosphodiestérase du venin de Crotalus sur la cellulose DEAE à pH alcalin est décrite. L'enzyme donne une seule bande dans les gels de polyacrylamide et est libre de contaminer les enzymes nucléolytiques. Le poids moléculaire est d'environ 115 000. La concentration dans un ultrafiltrateur Amicon a donné une enzyme active hautement concentrée. La phosphodiestérase est relativement stable et peut être stockée à 4 degrés C en présence de Mg2 et d'albumine sérique pendant des années. Pour la détection de l'endonucléase contaminante, un essai a été utilisé dans lequel l'ARN t était le substrat et des ruptures internes possibles ont été détectées dans le gel de polyacrylamide après la dénaturation. Avec le bis(p-nitrophényl) phosphate comme substrat, 15mM Mg2 était nécessaire pour une activité optimale. La réaction est restée linéaire pendant au moins 15 minutes à 22 degrés C. À 45 degrés C, la libération de p-nitrophénol a été la plus élevée dans les 25 minutes d'incubation. À 75 ° C, l'inactivation de l'enzyme a eu lieu après 4 minutes.
Hydrolyse limitée de l'ARN tRNA par la phosphodiestérase. La digestion de l'ARN t par la phosphodiestérase pure électrophorétique est limitée à une courte séquence de nucléotides au 3'-terminus. En moyenne, quatre pour cent de tous les nucléotides peuvent être libérés à partir de l'ARN t. La concentration optimale de Mg2 est de 10mM et le pH optimal est de 9,2. Le mode d'action est une attaque aléatoire de l'enzyme sur le substrat. L'AMP terminal est complètement éliminé à 15 degrés C après une courte incubation; environ 400 mol d'AMP ont été éliminés par minute par 1 mol d'enzyme. Les résidus CMP suivants sont libérés beaucoup plus lentement ; à 15 degrés C incomplètement, et à 37 degrés C plus ou moins complètement en 1 h. Dans environ 50% des molécules d'ARN t, le quatrième nucléotide pourrait être éliminé en très longues incubations ou avec des concentrations enzymatiques très élevées.
Ecdysone Oxidase, une enzyme de la mouche Calliphora erythrocephala (Meigen). Dans la flûte, la formation de 3-déhydroécdysone à partir de l'hormone moulante des insectes ecdysone est catalysée par une enzyme qui transporte l'hydrogène de l'ecdysone et de l'ecdysterone à l'oxygène. L’enzyme est donc appelée « ecdysone oxidase ». Deux méthodes sont décrites pour la détection de l'activité de l'oxydase d'ecdysone, l'une en utilisant un substrat radiomarqué qui est séparé du produit par la chromatographie en couche mince après la réaction, et l'autre en utilisant le dichloroindophénol, qui est décoloré par la réaction de redox. L'oxydase d'ecdysone est purifiée par un facteur de 2200 des prépuces de Calliphora erythrocephala à l'aide de la précipitation saline et de la chromatographie d'échange d'ions. L'oxydase d'ecdysone a une valeur de km pour l'ecdysone de 42muM. Le pH optimal est de 6,5. La température optimale est de 45 degrés C. L'oxydase d'ecdysone a un poids moléculaire de 240000.
Utilisation d'un hôpital pour la désensibilisation des peurs liées à la maladie d'un ambulatoire. Un patient ambulatoire souffrant de phobies liées à des lieux fermés, des hôpitaux, des médecins et du cancer a été traité par desensibilisation systématique; les installations d'un hôpital général ont été utilisées pour une partie du processus. Les étapes du traitement comprenaient la sécurisation d'une histoire psychiatrique et sociale complète, l'enseignement des techniques de thérapie de relaxation du patient et l'établissement d'une hiérarchie de stimuli anxieux spécifiquement liés aux peurs du patient. Après la désensibilisation, la patiente a pu entrer à l’hôpital pour des tests pour une maladie physique et a montré une diminution générale de ses peurs.
Analyse de l'immunosuppression générée par la réaction graft versus hôte. I. Un composant suppresseur de cellules T étudié in vivo. Les caractéristiques cinétiques et cellulaires de l'immunosuppression chez les souris (CBA-p X C57/Bl)F1 lors d'une réaction de greffe versus hôte (GVH) induite par des cellules de la rate de l'une des souches parentales ont été étudiées. Les effets sur les réponses des PFC aux antigènes thymus-dépendants (cellules rouges du sang de poulet) et indépendants (levan) ont été comparés. L'état non réactif qui s'est développé chez les souris GVH a été exprimé dans une mesure comparable par leurs cellules spline après transfert à des récepteurs irradiés. En outre, les cellules de la moelle GVH supprimaient les cellules de la moelle normale dans un système de transfert mixte, mais cet effet était complètement perdu au jour 21, alors que les donneurs originaux (ou leurs cellules) étaient encore totalement réfractaires après 80 jours. Cet effet suppresseur actif a été trouvé pour être médié par les cellules T d'origine perente basée sur l'analyse de fractionnement cellulaire et la suppression sélective des cellules donneuses ou hôtes par attaque alloimmune. Le transfert retardé des cellules GVH vers des récepteurs répopulés irradiés contestés par l'antigène, a indiqué que les cellules T suppresseurs exercent une influence anti-mitotique sur la prolifération des cellules B stimulées par l'antigène. La supplémentation de macrophages-épuisés, anti-theta-traitées cellules de spleen GVH avec des cellules T normales purifiées a démontré que les cellules B dans les souris GVH sont normalement réactifs même lorsque la suppression active par les cellules T n'est plus démontrable. La probabilité que cette phase ultérieure de l'immunosuppression soit attribuable à un autre mécanisme est discutée.
Variabilité associée au type pneumocoque dans l'activation des voies complémentaires alternatives. L'opsonisation de Streptococcus pneumoniae peut être médiée par la voie complémentaire alternative. Pour étudier l’importance de cette interaction avec la maladie humaine, la consommation de compléments par les pneumocoques de différents sérotypes a été mesurée dans le sérum de humne chélé avec de l’acide éthylénéglycoltraacétique, une substance qui bloque la voie classique mais pas la voie complémentaire alternative. Le sérotype I, contrairement à tous les autres types étudiés, manquait de la capacité de consommer des compléments dans ce système. La capacité des sérotypes III, IV et VIII à activer la voie alternative pourrait être éliminée par l'absorption préalable du sérum à O C avec le type en question, une condition qui éliminerait l'anticorps mais ne le compléterait pas. Les types VII, XII, XIV et XXV ont facilement activé la voie alternative dans le sérum non absorbé et absorbé. Les différences ne pouvaient pas être liées aux propriétés des capsules. On a conclu que les types I, III, IV et VIII manquent de la capacité intrinsèque d'activer et donc d'être opsonisés par la voie complémentaire alternative, bien que les types III, IV et VIII puissent le faire en concert avec des anticorps spécifiques. Le fait que ces mêmes types sont particulièrement importants dans la maladie humaine suggère que la capacité d'éviter l'opsonisation par la voie complémentaire alternative dans les phases pré-anticorps de l'infection peut être un facteur de virulence chez les pneumocoques.
Conditions de production et certaines caractéristiques du facteur d'inhibition de la croissance des mycobactéries produit par les cellules de la rate de souris immunisées avec des cellules viables de la souche H37Ra atténuée de Mycobacterium tuberculosis. Le facteur d'inhibition de la croissance des mycobactéries (MycoIF), trouvé dans les fluides supernatants des cultures de cellules de la rate de souris qui ont été stimulés in vitro par un antigène homologue, a inhibé la multiplication intracellulaire des bacilles de tuberculose virulente dans les macrophages peritoneaux de souris normaux in vitro. Les cellules de la rate de souris H37Ra immunisées à l'antigène ont nécessité 72 heures d'incubation pour produire des fluides supernatants qui provoqueraient une inhibition intracellulaire. Les fluides supernatants provenant de cultures cellulaires de la rate de souris de 48 heures n'ont pas été en mesure de produire une inhibition intracellulaire. L'enquête sur les conditions de culture a montré qu'à la location, 1,0% de sérum humain était nécessaire dans le milieu de culture des tissus pour la production de MycoIF par les cellules de la rate de souris immunisées. L'activité de MycoIF n'a été observée que dans les liquides supernatants provenant de cultures de cellules spline incubées avec de l'antigène pendant 72 h. MycoIF n'était pas dialysable et n'était pas affecté par la congélation, la lyophilisation ou l'incubation à 60 C pendant 30 min. Cependant, MycoIF a été inactivé après incubation à 80 ° C pendant 30 min. MycoIF n'a pas été affecté par de faibles concentrations d'ions d'hydrogène (pH 7 à 12), mais l'exposition à des concentrations plus élevées d'ions d'hydrogène (pH 6, pH 5) a considérablement diminué l'activité de MycoIF, et l'exposition à un pH 4 à 2 a aboli toute activité. Les liquides supernatants dilués 1:32 étaient encore capables de produire une inhibition intracellulaire significative de la croissance des bacilles de tuberculose virulente.
Effet des pneumocoques sur la coagulation du sang, les plaquettes et les leucocytes polymorphonucleaires. Les infections dues à Streptococcus pneumoniae et aux produits de l’organisme ont été associées à des altérations de la coagulation du sang et de la fonction des plaquettes. Les pneumocoques et les polysaccharides pneumocoques ont raccourci les temps de coagulation du sang entier, du plasma riche en plaquettes (PRP) et du plasma pauvre en plaquettes (PPP) in vitro. Les temps de coagulation de PPP et de PRP provenant d'animaux déficients en C6 ont également été réduits. Les bactéries n'ont pas eu d'effet sur le temps de prothrombine à un stade ou sur le temps de thromboplastine partiel lorsque les organismes ont été utilisés comme agents d'activation. Les plaquettes se sont agrégées en présence de pneumocoques, mais l'agrégation a été empêchée par l'ajout d'adénosine cyclique 3', 5'-monophosphate (cAMP). En outre, cAMP a corrigé le temps de coagulation raccourci de PRP en présence de pneumocoques. Le regroupement et la libération du coagulant polymorphonucleaire induit par les pneumocoques n'ont pas été empêchés par le cAMP. Ainsi, les pneumocoques exercent plusieurs effets thromboplastiques dépendant de la dose: (i) libération de substances thromboplastiques plaquettaires; (ii) effet thromboplastique direct; et (iii) libération de coagulant polymorphonucleaire.
Certaines propriétés d'une D-alanine carboxypeptidase dans les fractions d'enveloppe de Neisseria gonorrhoeae. Les préparations en enveloppe de la souche Neisseria gonorrhoeae GC1 (une souche stable, pilée de morphologie coloniale intermédiaire) et du type T1 possèdent une D-alanine carboxypeptidase qui libère le résidu d'alanine terminal du substrat d'uridine 5'-diphosphate-N-acétyl muramylpentapeptide (isolé à partir de Bacillus cereus T). La D-alanine carboxypeptidase des enveloppes GC1 a un pH optimal large entre 8.0 et 10.0. Lorsque la molarité du tampon tris(hydroxyméthyl)aminométhane a été variée, l'activité a montré un optimum sur la plage de 0,2 à 0,4 M. L'activité était plus élevée (135% du niveau de contrôle) lorsque 20 à 80 mM Mg2+ était présent. Le Km de l'enzyme était de 0,25 mM. La D-alanine carboxypeptidase a été inhibée par plusieurs antibiotiques bêta-lactamiques et les niveaux inhibiteurs de 50% étaient 10(-8) M pénicilline G, 10(-8) M ampicilline, 10(-5) M cloxacilline et 5 x 10(-7) M méthicilline.
Phénomène d'hémolyse à froid chaud : lysis chélatrice des érythrocytes traités par la sphingomyélinase. Staphylococcus aureus produit une phospholipase C spécifique à la sphingomyéline (beta-hémolysine). Il a été démontré que les érythrocytes avec environ 50% de sphingomyéline dans leurs membranes, par exemple des moutons, ont jusqu'à 60% de ce phospholipide hydrolysé par cette enzyme à 37 ° C dans la saline isotonique tamponnée sans hémolyse. Le refroidissement des érythrocytes traités par la sphingomyélinase C à 4 C provoque une lysie complète des cellules, un phénomène connu sous le nom d'hémolyse à froid chaud. L'ajout d'éthylène diaminétraacétate (EDTA) aux érythrocytes ovins préincubés par la sphingomyélinase C a été constaté pour induire une hémolyse rapide à 37 ° C. Les cellules traitées sont devenues sensibles à l'hémolyse induite par le chélateur et à l'hémol chaud-froid. Le degré de lysis des deux mécanismes a augmenté de manière égale avec la préincubation prolongée avec la sphingomyélinase C. Les érythrocytes d'espèces non facilement susceptibles d'hémolyse à froid chaud étaient également insensibles à la lysis induite par le chélateur. Les chélateurs de la série EDTA ont été les plus efficaces, tandis que les chélateurs plus spécifiques à Ca2+, Zn2+, Fe2+, Cu2+, et Mg2+ n'ont pas eu d'effet. Le taux de lysis induite par le chélateur dépendait de la période de pré-incubation avec la bêta-hémolysine et de la concentration du chélateur ajouté. La concentration optimale d'EDTA a été trouvée égale à la quantité de Mg2+ exogène ajouté, un cation nécessaire à l'activité de la sphingomyélinase C. L'hypotonie a augmenté le taux d'hémolyse induite par le chélateur, tandis que l'augmentation de la pression osmotique à deux fois l'isotonique a complètement inhibé la lyse induite par le chélateur. Les données suggèrent que les cations divalentes exogènes ajoutées et/ou liées à la membrane sont importantes pour la stabilité des membranes affaiblies par la sphingomyéline. Le phénomène de l'hémolyse chaud-froid peut être une conséquence de la dépendance de la température de la stabilisation des ions divalents.
Défense de l'hôte contre le pneumocoque chez les souris nues à carence en lymphocytes T. La résistance à l'infection pneumococcique a été testée chez des souris T-lymphocytes déficientes, nu/nu. L'activité opsonisante du sérum pneumococcique, la phagocytose in vivo du pneumococcus et la dose letale moyenne pour le pneumococcus ont tous été trouvés être les mêmes chez les souris nues que chez les souris de contrôle (+/+). Les lymphocytes T ne semblent pas jouer un rôle important dans la défense de l'hôte contre le pneumocoque.
Antagonisme in vitro des médiateurs de l'allergie par un acide carboxylique benzopyrane-benzopyrane PR-D-92-EA. Le PR-D-92-EA a été testé sur des bandes d'estomac de cochon et de rat isolés pour l'activité contre les médiateurs probablement libérés après la fusion des anticorps allergènes. Il a antagonisé la réponse produite par l'histamine, la bradykinine, la sérotonine, la prostaglandine E2, la prostaglandine F2ALPHA et la substance à réaction lente de l'anaphylaxie (SRS-A). Les concentrations qui bloquaient 50% de la réponse étaient de 150, 145, 92, 70, 47 et 32 mug/ml, respectivement. Ce composé peut être utile dans le traitement des conditions allergiques.
Induction de l'aminotransférase de tyrosine chez les poulets normaux et porteurs de tumeurs. L'induction de la tyrosine aminotransférase (TAT) par le glucagon et la dexaméthasone dans le foie des poulets porteurs de tumeurs a été étudiée et comparée à l'induction chez les animaux sains. La tumeur transplantable a été causée par l'inoculation de cellules d'une ligne cellulaire induite par le virus de la leucose aviaire MC29. TAT était à peine détectable dans les tissus tumoraux de contrôle et les poulets traités par la dexaméthasone, mais il a été induit par le glucagon à des niveaux qui étaient significatifs bien que très faibles par rapport à ceux dans le foie hôte ou le foie des contrôles non-tumeur-porteurs après le traitement par le glucagon. La dexaméthasone n'a pas induit la TAT dans le foie hôte à 8 heures du matin alors qu'elle indiquait de manière significative la TAT dans le foie normal à la même heure de la journée. Un échec similaire de l'induction de la TAT n'a pas été détecté lorsque le glucagon a été utilisé à la place de la dexaméthasone. En outre, il a été constaté que les variations diurnes des taux de TAT basal et de dexaméthasone ou induits par le glucagon sont considérablement atténuées dans le foie hôte par rapport à celles observées dans le foie d'animaux sains. Les raisons possibles de ces conclusions sont discutées.
Un programme de formation sur la modification du comportement pour le personnel travaillant avec les toxicomanes. Ce document décrit un programme de formation sur la modification du comportement, mettant l'accent sur l'auto-contrôle, pour le personnel travaillant avec les toxicomanes. Le programme, qui est principalement orienté vers la formation des paraprofessionnels, se déroule en dix séances de 1 à 2 heures et comprend un aperçu de la modification du comportement ainsi que des instructions sur les techniques de relaxation, de désensibilisation, d’amélioration de l’image de soi, d’analyse du comportement, de contrôle du comportement, de formation assertive, de pensée rationnelle, et comment mettre en place et mener des programmes de formation similaires pour le personnel et les patients. Depuis que cette formation a commencé au New Jersey Neuropsychiatric Institute en novembre 1971, un total de 898 membres du personnel, principalement des paraprofessionnels travaillant avec les toxicomanes, les alcooliques, les malades mentaux et les détenus, dont 53 de notre propre institution, 576 personnes d'autres installations au New Jersey, et 269 d'installations dans d'autres États, ont été formés, tandis que 2 021 patients ont été formés dans des programmes similaires. La plupart de ces formations ont été réalisées par des paraprofessionnels. Les données d’évaluation préliminaire ont été prometteuses et la réponse des participants enthousiaste.
Une étude cinétique de l'hydrolyse de l'ester méthyl de la N-acétyldéhydroalanine. Les taux d'hydrolyse de l'ester méthylique de la N-acétyldéhydroalanine (méthyl 2-acétamidoacrylate) et des composés de modèle connexes ont été mesurés dans des milieux aquatiques, organiques et mixtes. L'ajout de diméthylsulfoxide (DMSO) à l'eau retarde l'hydrolyse de l'ester d'un facteur de 2 à 500, en fonction du pH du milieu et de la concentration de DMSO. L'éthanol ralentit également l'hydrolyse, mais l'effet n'était pas si prononcé. Des études connexes montrent que le lien acétamide du groupe C-N du sodium 2-acétamide-acrylate n'est hydrolysé que d'environ 1/130 aussi rapidement que le lien ester du groupe C-O. Le diméthyl sulfoxide aqueux devrait être un moyen utile pour la synthèse de peptides, d'acides aminés et de dérivés de protéines de l'ester méthyl de la N-acétyléhydroalanine.
Le bureau de l'ophtalmologiste: planification et pratique. Trafic des patients et utilisation du personnel paramédical. Afin que l'ophtalmologiste puisse atteindre le plus grand pouvoir de gain et la satisfaction personnelle, il doit concevoir des techniques de flux de trafic qui permettent efficacement l'utilisation maximale de toutes les zones d'examen et du personnel paramédical dans le bureau sans déshumaniser les patients. En déléguant autant de responsabilités que possible au personnel, l’ophtalmologiste aura la possibilité d’exercer ses compétences spécialisées dans la plus grande mesure possible et par conséquent d’atteindre une satisfaction personnelle optimale. Cette récompense émotionnelle indemnisera l’avenir de la pratique privée, car elle ne peut exister que dans la présence d’une relation patient-physicien étroite, qui est la pierre angulaire de la pratique privée de l’ophtalmologie.
Évaluation informatique de l'effet de l'urecholine sur l'activité spontanée des muscles lisses de la vessie du lapin. L’activité spontanée détectée in vitro par les bandes musculaires lisses de la vessie urinaire du lapin sous l’influence de l’urecholine à des concentrations allant de 0,3 à 30 muM a été caractérisée en termes de trois paramètres : tension moyenne, fréquence de contraction et déviation contractile, tous obtenus par alyse informatique. Alors que la tension et la fréquence moyennes ont monotoniquement augmenté avec la concentration, l'écart contractile a atteint un pic dans les environs de 3,0 à 6,0 muM et a ensuite diminué. À des concentrations inférieures à 10 muM, les modèles contractiles étaient presque périodiques, tandis qu'à 10 et 30 muM, les modèles deviennent très erratiques. L'examen histologique d'un nombre limité de tissus a montré des ensembles musculaires longitudinaux orientés avec des anastomoses multiples.
Caractéristiques de la forme non occulte d'un virus de polyédrose nucléaire. Les virions non-occluses d'un virus de polyédrose nucléaire de la boucle de l'alpha, Autographa californica, trouvés dans le milieu des cultures cellulaires de l'armure infectée, Spodopter frugiperda, et dans l'hémolymphe des larves infectées de S. frugiperda ont été partiellement caractérisés par des méthodes biologiques, chimiques et physiques. En outre, le taux d'apparition des virions a été étudié dans la culture cellulaire et l'insecte hôte pour déterminer la production maximale de virions. Les virions obtenus des deux sources étaient sensibles à la chaleur, acides-labiles et inactivés par plusieurs solvants organiques. Les virions non-occlus trouvés dans le liquide de culture des cellules d'insectes et dans l'hémolymphe étaient identiques, et tous deux étaient des nucléocapsides enveloppés. La visualisation du nucléocapside fragilement enveloppé n'a été réalisée qu'après fixation avec du glutaraldéhyde. Les différences entre les virions non-occlus et occlus des virus de la polyédrose nucléaire sont discutées.
Dégradation de l'ARN virion du myxovirus par le périodate. L'ARN largement dégradé a été isolé des virions du virus de la grippe qui avaient été oxydés avec le m-périodate de sodium. De même, bien que dans une moindre mesure, l'ARN isolé de la ribonucleoprotéine du virus de la grippe traitée par le périodate a également été dégradé. En revanche, l'ARN du virus de la grippe, s'il a d'abord été libéré d'autres composants virionnels, n'a pas été dégradé par l'oxydation des périodés.
Le virus de la rubéole ne se reproduit pas chez les moustiques. Le virus de la rubéole a échoué à se reproduire chez les moustiques (Aedes albopictus et Culex fatigans) après inoculation parentérale. Le virus démontré chez les moustiques a été testé immédiatement après l'inoculation mais n'a pas été détecté chez les insectes échantillonnés après 7, 14 et 21 jours de postinoculation. Cette expérience fournit des preuves supplémentaires que la rubéole n'est pas un arbovirus, mais n'invalide pas sa classification comme un togavirus.
Traitement de l'hypertension sévère avec le minoxidil. Le minoxidil à des doses quotidiennes de 6 à 40 mg a été administré à 11 patients présentant une hypertension sévère. Deux patients sont morts de causes non liées au médicament et un patient s'est retiré de l'étude. La pression artérielle a été contrôlée chez les huit sujets restants, qui ont reçu le médicament pendant des périodes allant de 5 à 40 mois. Chez trois patients, le minoxidil pourrait par la suite être remplacé par un traitement antihypertenseur conventionnel. Les effets indésirables du minoxidil comprenaient la rétention de liquide (évaluée par des études d'œdème et de volume plasmatique), des modifications non spécifiques de l'ECG, une hypertrichose et une rougeur conjonctive. L'administration concomitante d'agents diurétiques et bêta-bloquants a entraîné une excellente tolérance du traitement et une haute conformité des patients.
[Sécrétion de parotides et leurs variantes pharmacologiquement induites (traduction de l'auteur)]. La sécrétion de l'alpha-amylase et des électrolytes par la glande parotidaire est maintenant bien comprise et des similitudes existent à cet égard entre l'homme et les animaux. De nombreux médicaments modernes influencent la sécrétion et la morphologie des parotides, et ceux-ci sont discutés.
Insuffisance rénale aiguë. L'insuffisance rénale aiguë est une situation mortelle pour laquelle un traitement satisfaisant est actuellement disponible. La mort est généralement liée à une infection concomitante plutôt que l'urémie. La reconnaissance et le traitement rapides des facteurs sous-jacents qui prédisposent à l'insuffisance rénale peuvent souvent prévenir le développement d'une insuffisance rénale aiguë intrinsèque.
Contrôle local de la résistance pulmonaire et de la conformité pulmonaire dans le poumon canin. Le contrôle local de la résistance pulmonaire et de la conformité pulmonaire a été étudié dans le lobe inférieur gauche in situ du poumon canin. La recirculation du sang à travers le lobe alors que le Pco2 du gaz de ventilation était varié a entraîné une augmentation de la résistance et une diminution de la conformité seulement lorsque le pH veineux pulmonaire était supérieur à 7,42. L'alternance de l'infusion de bicarbonate de sodium et d'acide lactique tandis que le Pco2 alvéolaire a été maintenu en dessous de 5 mmHg a démontré la dépendance de la réponse hypocapnique sur l'état acido-basique du sang perforant les voies respiratoires. L'augmentation de la résistance et la diminution de la conformité observées à un pH veineux pulmonaire de 7,64 était comparable à celle observée après l'occlusion de l'artère pulmonaire lobaire. Différents degrés d'hypoxie n'ont pas affecté de manière significative le tonus broncho-moteur, ni la broncho-constriction suivant l'occlusion de l'artère pulmonaire lobaire n'a été affectée par l'hypoxie. La stimulation vagale superposée à une augmentation progressive du pH veineux pulmonaire de 7,32 à 7,62 a entraîné une augmentation de la résistance qui a parallélisé l'augmentation de la résistance lorsque le pH veineux pulmonaire seul a été augmenté. La conformité n'a pas été significativement affectée par la stimulation vagale à n'importe quel niveau de pH veineux pulmonaire.
Analyse des pesticides par dérivation chimique. I. une nouvelle procédure pour la formation d'esters 2-chloréthyl de dix acides herbicides. Une nouvelle procédure d'esterisation a été développée pour former des esters 2-chloroéthyl pour 10 acides herbicides communs, en utilisant le dicyclohexyl carbodiimide et le 2-chloroéthanol. Ce réactif a été trouvé pour être plus souhaitable que le trichlorure de bore / réactif 2-chloréthanol couramment utilisé. L'estérification maximale a été donnée pour le picloram à une température de réaction plus basse avec un temps de réaction plus court. En outre, l'estérification maximale de dicamba et de 2,3,6-TBA a été atteinte. Le trichlorure de bore / 2-chloréthanol a donné une estérification faible ou faible avec ces 2 acides dans les différentes conditions étudiées. L'effet des solvants sur l'estérification avec les 2 réactifs a également été exploré.
Inactivation de la lyase citrate de Rhodopseudomonas gelatinosa par une déacétylase spécifique et inhibition de cette inactivation par L-(+1-glutamate. Une enzyme auparavant non reconnue, la citrate lyase déacétylase, a été purifiée environ 140 fois à partir d’extraits cellulaires de Rhodopseudomonas gelatinosa. Il a catalyse la conversion de l'acétyl-S-citrate lyase enzymatiquement active dans la forme HS inactive et l'acétate. L'enzyme a montré un taux d'inactivation optimal à un pH de 8,1. En raison de l'instabilité de l'acétyl-S-citrate lyase aux valeurs de pH acide et alcaline, tous les essais ont été effectués à pH 7,2, où l'hydrolyse spontanée de l'acétyl-S-citrate lyase était négligeable et la déacétylase a montré 70% de l'activité à pH 8,1. La valeur Km apparente pour la lyase citrate était de 10(-7) M au pH 7,2 et 30 C. L'activité de la déacétylase était limitée à la lyase citrate de R. gelatinosa. Les lyases correspondantes d'Enterobacter aerogenes (anciennement Klebsiella aerogenes) et de Streptococcus diacetilactis n'ont pas été désacétylées; de même, les thioesters tels que le coenzyme acétyl-S A, le coenzyme acétyl-S A et la N-acétyl-S-acétyl-cysteamine n'ont pas été hydrolysés. La citrate lyase désacétylase était présente en très petites quantités dans les cellules de R. gelatinosa cultivées avec de l'acétate ou du succinate ; elle était induite par le citrate avec la citrate lyase. L-(+)-Glutamate inhibe fortement la déacétylase. Une inhibition de 50 % a été obtenue à une concentration de 1,4 X 10(-4) L-(+)-glutamate. D-(-)-Glutamate, alpha-ketoglutarate, L-alpha-hydroxyglutarate, L-(-)-proline et autres métabolites ont été moins efficaces.
Nouveau type de murein transglycosylase dans Escherichia coli. La purification et les propriétés d'un nouveau type de murein transglycosylase d'Escherichia coli sont décrites. L'enzyme purifiée apparaît comme une seule bande sur les gels de sodium dodécyl sulfate-polyacrylamide et a un poids moléculaire apparent d'environ 65.000 estimé par la filtration de gel et l'électrophorèse de gel. Il dégrade presque complètement les sacs mureins purs d'E. coli en produits à faible poids moléculaire. Les deux fragments muropeptidiques importants dans le digeste sont le disaccharide-tripeptide N-acétylglucosamine-N-acétylmuramique-L-alanine-D-acide isoglutamique-meso-diaminopimélique et le disaccharide-tetrapeptide correspondant N-acétylglucosamine-N-acétylmuramique-L-alanine-D-acide isoglutamique-meso-diaminopimélique-D-alanine. La caractéristique unique de ces composés est que le disaccharide n'a pas de groupe final réducteur et que le résidu d'acide muramique possède un 1 interne conduit à 6 liaison anhydro. La nouvelle enzyme lytique est désignée comme un murein : murein transglycosylase. Son rôle éventuel dans la réorganisation du mureïn lors de la croissance cellulaire et de la division est discuté.
Formation et fracture du 2-keto-3-déoxygluconate par la 2-keto-3-déoxygluconate aldolase d'Aspergillus niger. 2-Keto-3-déoxygluconate aldolase d'Aspergillus niger, une enzyme qui n'a pas été rapportée auparavant, a été purifié 468 fois. L'activité maximale a été obtenue à pH 8.0 et 50 C. L'enzyme a montré une spécificité stéréochimique relative par rapport au glycéraldehyde. Les valeurs de Km pour le 2-keto-3-déoxygluconate, le glycéraldehyde et le pyruvate étaient 10, 13,3 et 3,0 mM, respectivement. Les effets de certains composés et inhibiteurs sur l'activité enzymatique ont été examinés. La stabilité de l'enzyme dans différentes conditions a été étudiée. La constante d'équilibre était d'environ 0,33 X 10(-3) M.
Chimiothérapie d'un streptocoque motile vers les sucres et les acides aminés. Un streptocoque mobile a été isolé et son comportement chimiotatique envers les sucres et les acides aminés a été étudié. La motilité était optimale en présence d'une source d'énergie exogène et d'un détergent non ionique, par exemple, Tween 80 ou Brij-36. Le glucose et le pyruvate peuvent servir de source d’énergie. La chimiothérapie envers la leucine était optimale à un pH de 7 à 8,5 et à une température comprise entre 30 et 37 ° C. Le streptocoque a montré une réponse chimiothérapeutique envers une variété de sucres. Tous les acides L-amino communs, à l'exception de l'alanine, de l'aspartate, de l'aspartate, du glutamate, de l'arginine et de la lysine, étaient des attrayants. À partir des courbes de réponse de concentration, les seuils, les concentrations de pointe et les réponses optimales ont été déterminés.
L'activité de la phospholipase D des bactéries gramnégatives. Une phospholipase hydrolysant la cardiolipine à l'acide phosphatidique et au glycérol phosphatidyl a été caractérisée dans les bactéries gramnégatives mais était absente dans les préparations des bactéries grampositives, Saccharomyces cerevisiae et mitochondries du foie de rat. Dans les extraits sans cellules d'Escherichia coli, de Salmonella typhimurium, de Proteus vulgaris et de Pseudomonase aeruginosa, cette enzyme hydrolysante à base de cardiolipine avait des exigences de pH et de Mg2+ similaires et présentait une spécificité qui exclut le phosphatidyl glycerol et l'éthanolamine phosphatidyl en tant que substrates.
Pyridine nucléotide liée oxydation du méthanol dans les levures d'assimilation du méthanol. Une déhydrogénase alcoolique liée au nicotinamide adénine dinucleotide et nécessitant du glutathion a été isolée et partiellement purifiée à partir de deux levures assimilant le méthanol. Il diffère des enzymes d'oxydation du méthanol précédemment décrites dans le pH optima, la spécificité de l'accepteur d'électrons, la spécificité du substrat, le schéma d'inhibition et la stabilité.
Expression des opérons de cabine de Salmonella typhimurium dans Klebsiella aerogenes et dans Escherichia coli. Les opérons histidiques normaux, ainsi que ceux présentant des mutations affectant la régulation de leur expression, de Salmonella typhimurium ont été introduits sur un épisode F dans les cellules de S. typhimurium et Klebsiella aérogènes dont les gènes chromosomiques ont été supprimés et dans les cellules d'Escherichia coli, dont le chromosome ne porte pas de gènes de chromosome. Les opérons de la cabane épisomique réagissent d'une manière très similaire à l'induction et à la répression catabolique dans les trois organismes. Les petites différences trouvées reflètent à la fois des capacités différentes pour absorber les inducteurs du milieu et des degrés différents de répression catabolique exercée par le glucose.
Régulation des opérons de cabine de Salmonella typhimurium et Klebsiella aerogenes par les répresseurs de cabine hétérogènes. Dans les souches merodiploïdes de Klebsiella aerogenes avec des gènes chromosomiques de K. aerogenes et des gènes épisomiques de Salmonella typhimurium, le suppresseur de l'une ou l'autre espèce peut réguler les opérons de la cabine des autres espèces. La répression exercée par le répresseur homologue sur l'opérone de la cabane gauche est, dans les deux organismes, plus forte que celle exercée par le répresseur hétérogène.
Transport de molybdate par Clostridium pasteurianum. Le transport de 99MoO42 dans les cellules de fixation de dinitrogène de Clostridium pasteurianum a été étudié. Le transport du molybdate dans cet organisme est dépendant de l'énergie; le saccharose est nécessaire dans les médias minimaux, et le système est inhibé par les inhibiteurs de la glycolyse, le NaF, l'acide iodoacétique et l'arsenate. Les cellules accumulent du molybdate contre un gradient de concentration, et l'absorption montre une dépendance marquée de la température (optimum 37 C) et du pH (optimum 6,0). Le taux d'absorption du molybdate avec des concentrations de molybdate croissantes montre la cinétique de saturation avec un Km et Vmax apparents de 4,8 X 10(-5) M et 55 nmol / g de cellules sèches par minute, respectivement. Des études d'inhibition avec les anions SO42-, S2O32-, WO42-, et VO32- montrent que SO42- et WO42- inhibent compétitivement l'absorption de MoO42 (le Ki apparent [SO42-] est de 3,0 X 10(-5) M; le Ki apparent [WO42-] est de 2,4 X 10(-5), alors que le S2O32- et le VO32- n'ont pas d'effet inhibiteur. Les expériences d'échange avec MoO42 montrent qu'un petit pourcentage seulement du 99MoO42 absorbé par les cellules est échangeable. Les expériences d'échange avec WO42 et SO42 indiquent qu'une fois à l'intérieur des cellules, WO42 et SO42 ne peuvent pas remplacer Mo42.
3-Deoxy-D-arabino-heptulosonique acide 7-phosphate synthase mutants de Salmonella typhimurium. La première étape engagée de la biosynthèse de l'acide aminé aromatique dans Salmonella typhimurium a été montrée être catalysée par trois isoenzymes de la synthase de l'acide 3-déoxy-D-arabino-heptulosonique 7-phosphate (DAHP). Les mutations dans chacun des gènes spécifiant les isoenzymes ont été isolées et cartographiées. aroG, le gène structurel de l'isoenzyme inhibable par la phénylalanine, était lié à gal, et aroH, le gène structurel de l'isoenzyme inhibable par le tryptophane, était lié à aroE. aroF, le gène structurel de l'isoenzyme inhibable de la tyrosine, a été lié à pheA et tyrA, qui spécifient respectivement les enzymes phénylalanine- et tyrosine-spécifiques. L'isoenzyme inhibable par la phénylalanine était la synthase DAHP prédominante dans les cellules de type sauvage, et seule l'isoenzyme inhibable par la tryosine a été complètement réprimée, ainsi que inhibée, par de faibles niveaux de son effecteur allostérique. Les isoenzymes de synthase du DAHP ont été séparés par chromatographie sur la diéthylaminoéthylcellulose avec un gradient de phosphate contenant du phosphate d'enolpyruvate pour protéger l'isoenzyme inhibable de la phénylalanine autrement instable. Aucune inhibition croisée de l'isoenzyme inhibiteur de la tyrosine ou de la phénylalanine n'a été observée à des concentrations d'inhibiteur allant jusqu'à 1 mM. L'isoenzyme inhibable par le tryptophane a été partiellement purifiée à partir d'extraits d'une souche qui manquait aux deux autres isoenzymes et s'est avéré être inhibée d'environ 30% par 1 mM de tryptophane. Une étude préliminaire sur l'interférence du tryptophane dans l'analyse du periodate-thyobarbiturate pour le DAHP a suggéré un effet combiné du tryptophane et de l'érythrose 4-phosphate, ou d'un composé d'aldéhyde résultant de la dégradation de l'érythrose 4-phosphate par le parodate.
Localisation membranaire d'une déoxyribonucléase impliquée dans la transformation génétique de Diplococcus pneumoniae. La localisation cellulaire des enzymes dans Diplococcus pneumoniae a été examinée par fractionnement des sphéroplastes. Une désoxyribonucléase impliquée dans l'entrée de l'acide désoxyribonucleïque (ADN) dans la cellule lors de la transformation génétique était située dans la membrane cellulaire. Cette enzyme, l'endonuclease principale de la cellule (endonuclease I), qui est nécessaire pour la conversion de l'ADN donneur à des fils uniques à l'intérieur de la cellule et des oligonucleotides à l'extérieur, pourrait donc agir sur la surface cellulaire. Une autre enzyme, la lysine de la paroi cellulaire (autolysine), a également été trouvée dans la fraction de membrane. D'autres enzymes, y compris l'amylomaltase, deux exonucléases et la déoxyribonucléase dépendante de la triphosphate d'adénosine, et une endonucléase de type restriction, se trouvaient dans le cytosol à l'intérieur de la cellule. Aucune des enzymes examinées n'était prédominantement périplasmique à l'emplacement. Les sphéroplastes ont été obtenus spontanément par incubation de cellules pneumocoques dans des solutions de sucre concentrées. L'enzyme autolytique semble être impliquée dans ce processus. Les cellules qui étaient physiologiquement compétentes pour absorber l'ADN ont formé des sphéroplastes osmotiques sensibles deux à trois fois plus rapidement que les cellules qui n'étaient pas dans l'état compétent. Bien que certains mutants génétiquement incompétents aient également formé des sphéroplastes plus lentement, d'autres tels mutants les ont formés à un rythme plus rapide.
Régulation de la synthase du dihydrodipicolinate pendant la croissance et la sporulation du Bacillus cereus. Une augmentation de quatre à six fois de l'activité spécifique de la synthase d'acide dihydrodipicolique a été observée lors de la sporulation de Bacillus cereus. L'enzyme provenant des cellules récoltées avant et après l'augmentation de l'activité spécifique semblait être très similaire en jugant par le pH optima, la cinétique de la dénaturation thermique, les constantes Michaelis apparentes, la chromatographie sur la diéthylaminoéthyl-cellulose et Sephadex G-200, et l'électrophorèse du gel de polyacrylamide. Des études avec diverses combinaisons d'acides aminés et l'un des substrates de l'enzyme, le pyruvate, n'ont pas donné de preuves de contrôle de l'enzyme par activation, inhibition, répression, induction ou stabilisation. L'omission de calcium du milieu de sporulation n'a pas eu d'effet significatif sur le schéma d'activité spécifique de l'enzyme en fonction de l'âge de culture.
D-lactate déshydrogénase de Peptostreptococcus elsdenii. D-lactate déshydrogénase a été purifié à l'homogénéité proche de Peptostreptococcus elsdenii. Comme isolé, l'enzyme contient flavine adénine dinucleotide et un cofacteur métallique étroitement lié. L'inactivation par l'ortho-phénanthhroline se produit en deux étapes et est partiellement bloquée par le D-lactate. La réactivation par les ions métalliques divalents se produit, le zinc divalent étant le plus efficace. Lorsque le ferricyanide est utilisé comme accepteur d'électrons, le D-lactate a un K0.5 apparent de 3.3 M0.46 ; sa liaison est négativement coopérative avec un coefficient de Hill de 0.46. Le remplacement du ferricyanide par les autres composants du système de transport d'électrons donne une kinétique hyperbolique avec un Km apparent pour le D-lactate de 26 mM. Le Km apparent pour le ferricyanide est 2,2 X 10(-4) M. Les composés de phosphate et de pyrophosphate stimulent l'activité du D-lactate:ferricyanide. Ces propriétés suggèrent que l'interaction de cette enzyme avec d'autres protéines de transport d'électrons dans la chaîne peut augmenter la liaison au D-lactate et, par conséquent, le taux de transport d'électrons.
Purification, nouvelle analyse et propriétés de la coenzyme A-transférase de Peptostreptococcus elsdenii. La coenzyme A (CoA) transférase de Peptostreptococcus elsdenii a été purifiée et cristallisée, et certaines de ses propriétés ont été établies. Le travail a été facilité par un essai spectrophotométrique récemment développé couplé et continu dans lequel la disparition de l'acrylate ajouté pouvait être suivie à 245 nm. La conversion limitant le taux de l'acétyl- et du bêta-hydroxypropionyl CoA en acrylique CoA par la CoA-transférase a été suivie de la conversion non limitant le taux en bêta-hydroxypropionyl CoA par l'excès de crotonase. Ainsi, une petite quantité de primage d'acétyl CoA a servi à générer de l'acrylique CoA, qui, par hydratation, a généré du bêta-hydroxypropionyl CoA. Ce produit a ensuite servi à générer plus de CoA acrylique de manière cyclique. Le résultat net a été la conversion de l'acrylate en bêta-hydroxypropionate limitée par le transfertase de CoA. La transfertase purifiée a un poids moléculaire de 125 000 et est composée de deux sous-unités de 63 000 chacune, déterminées par l'électrophorèse de gel de disque. Les acides monocarboniques à chaîne courte sont des substrates, tandis que les acides dicarboniques ou bêta-cétocarboniques ne le sont pas. La cinétique de la réaction est typique d'un mécanisme ping-pong bi bi composé de deux demi-réactions liées par un intermédiaire enzymatique covalent. L'incubation de la transfertase avec l'acétyl CoA en l'absence d'un accepteur d'acide gras a donné lieu à un intermédiaire stable qui, par spectrométrie d'absorption, mesures de radioactivité, réduction avec le borohydride, réactivité avec l'hydroxylamine et activité catalytique, a été identifié comme un composé enzymatique-CoA. Les constantes cinétiques de la CoA-transférase sont les suivantes: activité spécifique finale, 110 U/mg de protéine correspondant à 1,38 X 10(4) de mumol acrylique activé par mumol de transférase; Km pour l'acrylique, 1,2 X 10(-3) M; Km pour l'acétyl CoA (beta-hydroxypropionyl CoA), 2,4 X 10(-5) M.
Isolation et purification de Flavobacterium alpha-1,3-glucanase-hydrolysant, insoluble, glucan collant de Streptococcus mutans. Des études ont été menées sur les propriétés physiques et chimiques des polysaccharides synthétisés par des extraits sans cellules de Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis et Streptococcus sp. et leur susceptibilité aux dextranases. Parmi les polysaccharides examinés, les glucans insolubles étaient plutôt résistants aux préparations de dextranases disponibles, et le glucan insoluble et collant produit par S. mutans OMZ 176, qui pourrait être important dans la formation de plaques dentaires, était le plus résistant. En cultivant des spécimens de sol enrichi, en utilisant OMZ 176 glucanes comme seule source de carbone, un organisme a été isolé qui a produit des colonies entourées d'une zone lytique claire sur des plaques d'agar opaques contenant le glucan OMZ 176. L'organisme a été identifié comme une souche de Flavobacterium et nommé la bactérie Ek-14. La bactérie EK-14 a été cultivée dans le bouillon de soja Trypticase, et une enzyme capable d'hydrolyser le glucan OMZ 176 a été concentrée à partir de la culture supernatant et purifiée par adsorption négative sur une colonne diéthylaminoéthyl-cellulose (DE-32) et chromatographie d'élusion de gradient avec une colonne carboxyméthyl-cellulose (CM-32). L'enzyme était une protéine de base avec un point isoélectrique de pH 8.5 et un poids moléculaire de 65.000. Son pH optimal était de 6,3 et sa température optimale était de 42 ° C. L'enzyme purifiée libérait 11% des résidus de glucose totaux du glucan OMZ 176 en tant que sucres réducteurs et dissout environ la moitié du glucan de substrat. Les produits ont été trouvés isomaltose, nigerose, et nigerotriose, avec quelques oligosaccharides. L'enzyme purifiée divise l'alpha-1,3-glucan endolytiquement et est inactive envers les glucans contenant l'alpha-1,6, l'alpha-1,4, le bêta-1,3, le bêta-1,4, et/ou le bêta-1,6 comme les principaux liens.
Production, purification et caractérisation d'une chitosanase extracellulaire à partir de Streptomyces. La synthèse par Streptomyces sp. no. 6 d'une chitosanase extracellulaire a été induite par la glucosamine. L'enzyme a été purifiée à l'homogénéité par Sephadex G-100, carboxyméthyl-cellulose et chromatographie diéthylaminoéthyl-cellulose. L'enzyme purifiée hydrolyse le chitosan (le polymère lié à la bêta-1,4 de la glucosamine), mais pas la chitine ni la carboxyméthyl-cellulose. Les seuls produits de l'hydrolyse détectables par chromatographie papier étaient la di- et la triglucosamine. La chromatographie de Sephadex G-100 et l'électrophorèse du gel de sodium dodécyl sulfate-polyacrylamide ont indiqué que le poids moléculaire de l'enzyme était compris entre 29 000 et 26 000. Les hydrolysats acides de l'enzyme ne contiennent pas d'acide kystique ou de glucosamine ou d'autres glucides. À 25 °C, l'activité maximale a été obtenue entre pH 4.5 et 6.5. L'hydrolyse enzymatique du chitosan s'est produite sur une large gamme de températures et a été maximale à 60 °C. La vitesse de la réaction a été inhibée par des concentrations de chitosan soluble supérieures à 0,5 g/litre. Le Km apparent calculé à partir d'une parcelle de Lineweaver-Burke était de 0,688 g/litre à un pH de 5,5. L'enzyme a empêché la germination des spores et provoqué une diminution significative de la turbidité des suspensions spores germinées des souches de Mucor testées. Une telle diminution était le résultat d'une lysis partielle de la paroi cellulaire.
Procédure simple et sensible pour le dépistage des mutants de levure qui brillent à des températures non permissives. Après la mutagénèse, les cellules de levure survivantes sont cultivées sur des plaques à 25 ° C et plus tard exposées à 37 ° C. Les plaques sont ensuite recouvertes d'un agar doux contenant du p-nitrophénylphosphate à pH 9,7. Les cellules lysées libèrent de la phosphatase alcaline qui donne naissance à une couleur jaune sur et autour des colonies.
Une déoxyribonucléase dépendante du triphosphate nucléoside de Bacillus laterosporus. Purification et caractérisation de l’enzyme. Une désoxyribonucléase, qui nécessite du triphosphate de nucléoside pour la réaction, a été purifiée environ 150 fois à partir d'extraits de Bacillus laterosporus. Le phosphate de potassium et l'éthylène glycol stabilisent l'enzyme purifiée. L'enzyme dégrade l'ADN à double chaîne environ 100 fois plus rapidement que l'ADN à dénaturation thermique en présence de triphosphate de nucléoside. L'ADN à double fil n'est pas dégradé dans une mesure mesurable en l'absence d'ATP, mais l'enzyme expose une activité vers l'ADN dénaturé en l'absence de triphosphate de nucléoside, et cette activité semble être une propriété intrinsèque de cette protéine enzymatique. Le pH optimal est de 8,5 et l'activité maximale est obtenue en coprésence de Mg2+ (8.0 X 10(-3)M) et Mn2+ (7.0 X 10(-5)M). ATP et dATP sont les plus efficaces et les di- ou monophosphates nucléosides sont inefficaces. L'ATP est converti en ADP et en phosphate inorganique au cours de la réaction et le ratio de la quantité d'ATP séparée à celle des liaisons hydrolysées de phosphodiesters de l'ADN est d'environ 3:1. Un inhibiteur de l'enzyme a été observé dans les extraits bactériens préparés par perturbation sonore; la substance inhibiteur est produite dans les bactéries dans les stades ultérieurs de la croissance cellulaire. Les résultats préliminaires montrent que l'inhibiteur est apparu près du volume vide d'une colonne de Sephadex G-200, et était relativement stable à la chaleur, résistant à la RNase et sensible à la DNase.
Test radioimmunitaire rapide pour le monophosphate cyclique de guanosine 3',5' en utilisant du ligand tritié. Une procédure d'analyse radio-immunitaire pour la guanosine 3',5'-monophosphate cyclique (CGMP) est décrite. La procédure est basée sur la liaison concurrentielle entre le [3H]CGMP et le CGMP non radioactif, avec la séparation du CGMP lié et non lié par la filtration de Millipore. La réaction de liaison a montré une spécificité très élevée au CGMP, a eu un pH optimal large, et a atteint l'équilibre dans un court laps de temps. Une procédure simple pour la pruification des échantillons d'analyse à l'aide de la résine Dowex AG 50W-X2 est également décrite. La teneur en CGMP dans les échantillons d'urine a été évaluée sans purification. L'injection de glucagon dans des volontaires humains sains a entraîné une petite mais significative réduction du taux de CGMP urinaire, tandis que l'excrétion de CAMP a augmenté de manière spectaculaire.
L'effet de l'administration de tryptophane sur la synthèse des acides gras dans le foie des rats dans diverses conditions nutritionnelles. Le tryptophane a été administré aux rats dans diverses conditions nutritionnelles: jeûné pendant 24 heures, jeûné et jeûné avec du glucose ou de l'huile de maïs, jeûné et administré du glycérol intramusculairement et non jeûné.1. Les modifications de la teneur en intermédiaires glycolytiques dans le foie ont indiqué que la réaction de la phosphoenolpyruvate carboxykinase [EC 4.1.1.32] est inhibée par l'administration de tryptophane chez tous les groupes de rats. Les changements inversement liés dans la teneur en malate et en phosphoénolpyruvate ont été associés à l'accumulation de quinolinate dans le foie. La teneur en quinolinate qui a montré l'effet semi-maximum sur le contenu des deux métabolites était de 0,1 à 0,2 mumole par g de foie. Le taux d'incorporation de 3H de 3H2O dans le total des acides gras hépatiques a été augmenté d'environ 2 fois par l'administration de cet acide aminé aux rats à jeun. L'augmentation du taux était étroitement liée à l'augmentation de la teneur en citrate. L'hyperlipogénèse a également été liée à la diminution de l'acétyl-CoA et à l'augmentation du malonyl-CoA. La teneur en acyl-CoA à longue chaîne n'a pas été affectée. Ces effets de l'administration de tryptophane sur le métabolisme des acides gras hépatiques ont été trouvés dans tous les groupes de rats. La teneur en glycérol 3-phosphate dans le foie a été réduite par l'administration de tryptophane et a été considérablement augmentée par l'injection de glycérol. L'injection de glycérol dans le contrôle et les rats traités par le tryptophane ont produit une augmentation marquée du glycérol 3-phosphate mais n'a pas affecté le taux de synthèse des acides gras dans le foie des deux groupes. On peut conclure que, dans le foie des rats dans diverses conditions nutritionnelles, le contrôle à court terme de la synthèse des acides gras par l'administration de tryptophane est le plus probable dû à l'activation de l'acétyl-coenzyme A carboxylase [EC 6.4.1.2] par le citrate.
Études électrophorétiques du changement de conformation acide de l'alpha-lactalbumine. Afin de clarifier comment le comportement électrophorétique reflète la transition de conformation des protéines globulaires, l'électrophorèse de limite mobile a été appliquée à l'analyse du changement de conformation acide de l'alpha-lactalbumine. L'apparition d'une seule limite électrophorétique dans la région de transition de la protéine suggère une transition très rapide avec une demi-vie estimée à être inférieure à 7 min sur la base de la théorie des systèmes isomérisants dans l'électrophorèse. La transition se reflète clairement dans la dépendance de la mobilité sur la charge nette des protéines, ce qui montre une courbe sigmoïde similaire à celle obtenue par un complot de pH-tritration Linderstrøm-Lang pour les groupes carboxyle de l'alpha-lactalbumine. Il a également été conclu des courbes de transition que l'acidification n'entraîne pas un déploiement complet, mais qu'une structure compacte est maintenue dans la région acide avec une forme apparemment élargie par rapport à l'état natif de la protéine. Tous les résultats obtenus par électrophorèse ont également été soutenus par les résultats d’études de saut de pH, de chromatographie analytique au gel et de mesures de CD.
Études sur les catépsines des lysosomes du foie de rat. Études comparatives sur les formes multiples de catépsine A. Les formes multiples de catépsine A (AI, AII et AIII) purifiées de la fraction lysosomique du foie de rat par les chromatographies Sephadex G-200 et DEAE-Sephadex ont été étudiées de manière comparative. Les formes AI, AII et AIII étaient stables entre le pH 3,0 et 5,5 et avaient un pH optimal pour le CBZ-Glu-Phe à 5,6, 5,8 et 5,9 respectivement. Ces activités ont été rapidement perdues sur le chauffage au-dessus de 60 degrés. Leurs points isoélectriques étaient à 4,7, 4,8 et 4,9, et les constantes Michaelis pour CBZ-Glu-Phe ont été calculées comme 10, 6,6 et 4,2 X 10(-4)M, respectivement. L'activité a été inhibée par Ag+, Au3+, Hg2+, iode et p-chloromètre curibenzoate (PCMB). Le diisopropyl fluorophosphate (DFP), le phénylmethanesulfonyl fluorure (PMSF), le toluénesuffonyl fluorure (TSF), et le dodécyl sulfate de sodium (SDS) étaient inhibiteurs à une concentration de 10(-3)M. Inhibiteur de la trypsine de soja, pepstatine, leupeptines, et antipain n'étaient pas inhibiteurs, tandis que la chymostatine provoquait une légère inhibition. Aucune différence distincte n'a été observée dans les effets de ces composés sur les formes multiples de catépsine A, en dépit des différences dans les poids moléculaires de ces formes (100 000, 200 000 et 420 000, respectivement). Dans l'analyse de diffusion immunitaire, la cathépsine AI, AII et AIII qui avaient été traitées avec EDTA, dithiothreitol, PCMB, et une concentration élevée de NaCl, ont donné les mêmes schémas de précipitine que les enzymes non traitées, mais le traitement avec l'urée 6 M a provoqué une légère altération du schéma. Après le traitement par SDS (50 mM ou plus), les lignes de précipitine de ces formes multiples se sont fusionnées et ont donné une seule ligne identique. Cela suggère que les différentes formes de la catépsine A sont toutes composées de sous-unités qui sont immunologiquement identiques ou étroitement liées, et que les sous-unités sont principalement liées par des forces hydrophobes. Cette conclusion est soutenue par les résultats obtenus par l'électrophorèse du gel de polyacrylamide en présence de SDS.

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